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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR问题
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哈皮果果

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR问题 已有1人参与

亲爱的们，荧光定量PCR第一次做，问题多多，希望虫友们给点建议和意见哈，多多益善哦，呵呵
荧光定量PCR体系如下：
20微升体系
上下游引物各1 微升
cDNA模板：2 微升（反转录后，用ND2000 测了下反转录体系中CDNA浓度，虽然不是很准确，但是知道个大概哈，用的是200ng/微升；反转录前，使用1微克量的RNA进行反转录的）
SYBR GREEN MIX：10 微升
DYE 1：0.4 微升
ddH20：5.6 微升

希望各位高手结合图形和体系，帮忙分析下，谢谢大家！（Actin 跑的很奇怪，抬头很快！）

荧光定量PCR问题
Amplification Plot.jpg


荧光定量PCR问题-1
Melt Curve.jpg
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你好明天
1楼 2014-12-06 09:30:47
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JNVBNC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

melt curve好奇怪啊~体系感觉没有问题，有程序吗？
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2楼2014-12-17 00:59:53
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