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哈皮果果

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR问题已有1人参与

亲爱的们,荧光定量PCR第一次做,问题多多,希望虫友们给点建议和意见哈,多多益善哦,呵呵
荧光定量PCR体系如下:
20微升体系
上下游引物各1 微升
cDNA模板:2 微升(反转录后,用ND2000 测了下反转录体系中CDNA浓度,虽然不是很准确,但是知道个大概哈,用的是200ng/微升;反转录前,使用1微克量的RNA进行反转录的)
SYBR GREEN MIX:10 微升
DYE 1:0.4 微升
ddH20:5.6 微升

希望各位高手结合图形和体系,帮忙分析下,谢谢大家!(Actin 跑的很奇怪,抬头很快!)

荧光定量PCR问题
Amplification Plot.jpg


荧光定量PCR问题-1
Melt Curve.jpg
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你好明天
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JNVBNC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

melt curve好奇怪啊~体系感觉没有问题,有程序吗?
2楼2014-12-17 00:59:53
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