| 查看: 3743 | 回复: 4 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
最近做原核表达，蛋白全在在包涵体中，优化了条件也不行，怎么办？ 已有1人参与
|
||
|
最近用Rosetta菌株表达一个植物蛋白，使用的是pET28a载体，18度诱导过夜全在包涵体中，通过纯化上清，只能拿到很少的蛋白。后来在16度条件下优化条件，包括诱导剂的量，诱导时间，加葡萄糖或乙醇。但是没有效果。请问有经验的高手有什么好的建议吗？ PS：图片中是16度优化条件的结果。蛋白大小大概是50kDa。  Administrator 2016-04-22 01hr 25min.jpg  Administrator 2016-04-22 01hr 27min.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有134人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 原核表达蛋白时不加诱导剂也有目的蛋白表达，怎么回事？
已经有2人回复
- 关于原核表达后，WB条带不单一的问题。请大神帮忙！
已经有5人回复
- 蛋白原核表达
已经有16人回复
- 请教大家原核表达的几个问题，望好心人解答！
已经有32人回复
- 原核表达破碎后蛋白在沉淀里，以前都是在上清，是变成包涵体了吗？
已经有2人回复
- 最近在做原核表达纯化，但是蛋白一直都没有诱导出来。好捉急啊！
已经有9人回复
- 膜蛋白为什么在原核中难以表达，从理论上解释。。。多谢。。
已经有3人回复
- 蛋白原核表达和包涵体纯化问题
已经有8人回复
- 关于原核表达肠激酶切，做了两次了都没切开。
已经有4人回复
- 原核表达的蛋白诱导出来大小不对，请各位高手指点，急急急
已经有25人回复
- 原核表达的蛋白诱导不出来，请各位高手指点，急急急
已经有32人回复
- 原核表达诱导不表达
已经有13人回复
- 原核表达的蛋白诱导不出来，请各位高手指点，急求。
已经有1人回复
- 原核表达蛋白时标签无论在N端还是C端蛋白折叠时都被折进去了，怎么办
已经有18人回复
- 原核表达 蛋白质全在沉淀里，这是怎么回事啊
已经有12人回复
- 原核表达做不出来了！
已经有15人回复
- 最近做原核表达，有些问题求大神帮助啊
已经有6人回复
- 关于原核表达
已经有8人回复
- 原核表达
已经有15人回复
- 原核表达蛋白分子量大小
已经有13人回复
- 原核表达蛋白诱导不出来
已经有16人回复
- 原核表达蛋白分子预测
已经有1人回复
- 原核表达的蛋白会被磷酸化吗？
已经有1人回复
5楼2018-06-15 15:56:50
2楼2016-04-23 16:21:39
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
超级马力: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-04-25 10:12:45
感谢参与，应助指数 +1
超级马力: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-04-25 10:12:45
|
加标签是可以，但是我们通常可以尝试下其他表达载体，比如换一些启动子较弱的载体 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-04-23 21:23:28
star013 
新虫 (知名作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1488.5
- 散金: 831
- 红花: 33
- 帖子: 5395
- 在线: 493.3小时
- 虫号: 1401381
- 注册: 2011-09-14
- 专业: 法学
4楼2016-04-24 10:31:47
40