| 查看: 1457 | 回复: 4 | ||
[求助]
关于原核表达肠激酶切，做了两次了都没切开。已有2人参与
|
|
最近在用PET30a表达了一个蛋白，到了肠激酶酶切这一步卡住了，切了两次了都没切开。 目的蛋白50KDa左右，切除后应该是43kDa左右（His标签大概7kDa），但是蛋白电泳图跟对照和marker都一致在50。 我的蛋白液100ml左右，用了两次100ul的肠激酶了（总共200ul），酶切条件是22°，16h。 各位帮忙分析下原因，谢谢咯。 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有251人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
怎样能得到高纯度的蛋白？
已经有10人回复- 融合表达与非融合表达的选择
已经有3人回复
- pET-30a(+)不表达
已经有16人回复
- 我的蛋白在大肠杆菌中表达量低怎么办？
已经有7人回复
- 融合表达蛋白酶的表达
已经有26人回复
- 目的基因合成在大肠杆菌里能表达么？
已经有3人回复
- 融合蛋白的linker怎么设计
已经有14人回复
- 急！蛋白截短表达不成功~
已经有8人回复
- 蛋白互作必会，GST纯化遇到的问题
已经有13人回复
- 目的蛋白加myc或his标签？
已经有10人回复
- 辣根过氧化物酶（HRP）能与其他蛋白融合表达吗？？
已经有4人回复
- 原核表达标签的切除，及信号肽的影响
已经有5人回复
- 融合蛋白在大肠杆菌中的表达，怎么被我越做越复杂了？
已经有8人回复
- 关于蛋白重组表达的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？
已经有28人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌中蛋白表达的问题
已经有9人回复
rodickholm
木虫 (正式写手)
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 2044.2
- 散金: 1564
- 红花: 7
- 帖子: 675
- 在线: 235.3小时
- 虫号: 562916
- 注册: 2008-05-24
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
2楼2014-05-26 09:06:18
3楼2014-05-26 11:05:15
anyaxiong
铁杆木虫 (知名作家)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 8751.8
- 散金: 2291
- 红花: 26
- 沙发: 63
- 帖子: 8730
- 在线: 743.1小时
- 虫号: 974100
- 注册: 2010-03-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2014-05-26 11:14:35
5楼2014-05-26 14:45:39