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SDS-PAGE拖尾严重,求分析原因

作者 tyz2018
来源: 小木虫 600 12 举报帖子
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最近跑SDS-PAGE经常拖尾,降低了上样量也拖尾。实在找不出原因了,希望有大神帮忙分析一下问题!!!跪谢!!!
所有条件:
50V 浓缩胶  80V分离胶,电流在10-15 mA,跑两个半小时。(应该可以排除电流过大导致胶融化的因素)
8%分离胶,分离胶凝了4小时左右。(应该可以排除胶凝的不好的因素)
上样量:左边四个泳道上样50 ug,右边四个泳道上样25 ug,上样体积小于20 ul 。(应该可以排除上样量过大的因素)
样本:大鼠肾脏组织,提蛋白的过程中加了PMSF。(应该可以排除蛋白降解的因素)

SDS-PAGE拖尾严重,求分析原因
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今日热帖
  • 精华评论
  • 030Selma

    1可能是胶没做好,2可能是核酸污染

  • sunny0810

    可能是缓冲液不行了,一般缓冲液跑三次胶就要换掉;但可能也与电压有关系,一般120V,60 min左右

  • alexkipici

    有PMSF也不能完全排除蛋白酶降解,MARKER呢?MARKER有同样问题的话GEL就有问题了

  • jmqt7140

    宝,推荐你一个网站,英格恩生物技术博客,上面有很多基础实验,你这个问题我之前看到过,你可以去搜一下。https://www.engreen.cn/

  • 茶米同学

    引用回帖:
    10楼: Originally posted by sunny0810 at 2020-11-03 21:49:51
    可能是缓冲液不行了,一般缓冲液跑三次胶就要换掉;但可能也与电压有关系,一般120V,60 min左右

    你好  那一般情况下 电流是多少比较好  

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