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SDS-PAGE拖尾严重,求分析原因

作者 tyz2018
来源: 小木虫 600 12 举报帖子
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最近跑SDS-PAGE经常拖尾,降低了上样量也拖尾。实在找不出原因了,希望有大神帮忙分析一下问题!!!跪谢!!!
所有条件:
50V 浓缩胶  80V分离胶,电流在10-15 mA,跑两个半小时。(应该可以排除电流过大导致胶融化的因素)
8%分离胶,分离胶凝了4小时左右。(应该可以排除胶凝的不好的因素)
上样量:左边四个泳道上样50 ug,右边四个泳道上样25 ug,上样体积小于20 ul 。(应该可以排除上样量过大的因素)
样本:大鼠肾脏组织,提蛋白的过程中加了PMSF。(应该可以排除蛋白降解的因素)

SDS-PAGE拖尾严重,求分析原因
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  • 精华评论
  • jurkat.1640

    可能是DNA引起样品粘稠的结果

  • tyz2018

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2020-10-28 14:22:19
    可能是DNA引起样品粘稠的结果

    但是提取出来的蛋白并不粘稠欸

  • tyz2018

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2020-10-28 14:22:19
    可能是DNA引起样品粘稠的结果

    但是提取出来的蛋白并不粘稠欸

  • tyz2018

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2020-10-28 14:22:19
    可能是DNA引起样品粘稠的结果

    但是提取出来的蛋白并不粘稠欸

  • tjj451679479

    没有把沉淀加进去吧?如果不是请自动忽略。

  • 苏氨酸

    marker咋样?是不是样本盐浓度太高

  • 正清哲和

    连成丝状,感觉是缓冲液不新鲜了,电泳了多次,或长微生物了,导致缓冲液粘稠,电极气泡丝状冒起来,不能及时消散

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