SDS-PAGE拖尾严重,求分析原因
最近跑SDS-PAGE经常拖尾,降低了上样量也拖尾。实在找不出原因了,希望有大神帮忙分析一下问题!!!跪谢!!!
所有条件:
50V 浓缩胶 80V分离胶,电流在10-15 mA,跑两个半小时。(应该可以排除电流过大导致胶融化的因素)
8%分离胶,分离胶凝了4小时左右。(应该可以排除胶凝的不好的因素)
上样量:左边四个泳道上样50 ug,右边四个泳道上样25 ug,上样体积小于20 ul 。(应该可以排除上样量过大的因素)
样本:大鼠肾脏组织,提蛋白的过程中加了PMSF。(应该可以排除蛋白降解的因素)
IMG_20201028_091723.jpg 返回小木虫查看更多
今日热帖
可能是DNA引起样品粘稠的结果
但是提取出来的蛋白并不粘稠欸
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但是提取出来的蛋白并不粘稠欸
但是提取出来的蛋白并不粘稠欸
没有把沉淀加进去吧?如果不是请自动忽略。
marker咋样?是不是样本盐浓度太高
连成丝状,感觉是缓冲液不新鲜了,电泳了多次,或长微生物了,导致缓冲液粘稠,电极气泡丝状冒起来,不能及时消散