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dirkyoung金虫 (正式写手)
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western的转膜液配方
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最近做大蛋白western遇到一点点问题,于是在网上发现了两种转膜液配方。 配方一:Tris 5.8g,甘氨酸 2.9g,SDS 0.376g 配方二:Tris 3.05g,甘氨酸 14.4g 甲醇都是200ml,然后1L定容。 方案二是我们实验室一直在用的,当然会加极少量的SDS,对于100kd一下的蛋白没有问题,200kd以下的勉强能行,200kd以上的之前没人做过,我做了不行。那么这两个配方里甘氨酸为什么差别会这么大呢?或者说这两种方案各有什么适用范围? 另外我还看到说调整甲醇和SDS的含量对于大蛋白的电转有帮助,不知是否如此。 |
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