LIVE/DEAD® BacLight Bacterial Viability Kits测定E.coli浓度
如题,实验需要用LIVE/DEAD® BacLight Bacterial Viability Kits测定E.coli浓度,文献上说的是先染色,再The stained bacteria were imaged with an epifluorescence microscope (Olympus) with a U-filter (364 nm) for imaging cells stained with both PI and DAPI and an IB filter (464 nm) for detecting cells stained with only PI。
请问染色后,定量部分具体如何操作,需要什么仪器呢? 返回小木虫查看更多
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使细菌尽量均匀分布于黑色膜上,黑色膜一般使用25mm的好像,
显微镜下的视野面积可以从物镜的型号得知,
数显微镜视野下的菌数,变化视野,再数,至少数10个视野以上,取平均值,
然后通过一个系数换算出膜上的细菌数。
这样数有一定的风险,就是细菌在膜上分布不均匀,尽量数很多视野,视野遍布黑色膜的各个部分。
这种方法在很多文献上可以查到。
几年前做过,等我回国后还要做这个实验
回答我的还是前辈啊感动~~
我需要测试两种情况下的大肠杆菌浓度:1、溶液里的E.coli浓度;2、薄膜上截留的E.coli浓度
今天上午咨询了试剂公司技术部门,他们说染色后能用荧光显微镜下照相并计数,两种情况都行(文献是这么做的,具体详细的没提到);可是打电话给学院负责荧光显微镜的老师,他却说只能用透光的玻片来做。
前辈说的黑色膜透光吗?哪里可以买到呢
,
找到说明书了,慢慢啃
black membrane is not transparent, it can be acquired from Whatman or Millipore.
maybe my fluorescence microscope is different from yours.
there are some Chinese articles about this method.
请问,我想做活性炭上面的微生物量,混合种群的,用DAPI染色好呢,还是LIVE/DEAD好,哪个经济些
LIVE/DEAD包括PI 和DAPI