应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » LIVE/DEAD® BacLight™ Bacterial Viability Kits测定E.coli浓度
211/3返回列表123下一页
查看: 2728  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

XXH_QB

木虫 (正式写手)

[交流] LIVE/DEAD® BacLight™ Bacterial Viability Kits测定E.coli浓度 已有9人参与

如题，实验需要用LIVE/DEAD® BacLight™ Bacterial Viability Kits测定E.coli浓度，文献上说的是先染色，再The stained bacteria were imaged with an epifluorescence microscope (Olympus) with a U-filter (364 nm) for imaging cells stained with both PI and DAPI and an IB filter (464 nm) for detecting cells stained with only PI。
请问染色后，定量部分具体如何操作，需要什么仪器呢？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

细胞毒性实验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-02-23 16:46:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhangxingc: 金币+5, 鼓励有价值回帖，奖励一下 2013-02-25 09:09:48
使细菌尽量均匀分布于黑色膜上，黑色膜一般使用25mm的好像，

显微镜下的视野面积可以从物镜的型号得知，

数显微镜视野下的菌数，变化视野，再数，至少数10个视野以上，取平均值，

然后通过一个系数换算出膜上的细菌数。

这样数有一定的风险，就是细菌在膜上分布不均匀，尽量数很多视野，视野遍布黑色膜的各个部分。

这种方法在很多文献上可以查到。
赞一下(1人) 回复此楼
环境卫生、微生物学、卫生应急
2楼2013-02-25 08:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tina2013liti

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用荧光显微镜拍照，数数目，或者用软件计算荧光面积，也能得到细菌数量
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2013-12-10 13:52:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
几年前做过，等我回国后还要做这个实验
赞一下 回复此楼
环境卫生、微生物学、卫生应急
3楼2013-02-25 08:53:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XXH_QB

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-02-25 08:53:10
使细菌尽量均匀分布于黑色膜上，黑色膜一般使用25mm的好像，

显微镜下的视野面积可以从物镜的型号得知，

数显微镜视野下的菌数，变化视野，再数，至少数10个视野以上，取平均值，

然后通过一个系数换算出膜 ...

回答我的还是前辈啊感动~~
我需要测试两种情况下的大肠杆菌浓度：1、溶液里的E.coli浓度；2、薄膜上截留的E.coli浓度
今天上午咨询了试剂公司技术部门，他们说染色后能用荧光显微镜下照相并计数，两种情况都行（文献是这么做的，具体详细的没提到）；可是打电话给学院负责荧光显微镜的老师，他却说只能用透光的玻片来做。
    前辈说的黑色膜透光吗？哪里可以买到呢？
赞一下 回复此楼
4楼2013-02-25 12:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XXH_QB

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-02-25 08:53:58
几年前做过，等我回国后还要做这个实验

找到说明书了，慢慢啃
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-25 13:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
black membrane is not transparent, it can be acquired from Whatman or Millipore.

maybe my fluorescence microscope is different from yours.

there are some Chinese articles about this method.
赞一下 回复此楼
环境卫生、微生物学、卫生应急
6楼2013-02-26 00:19:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tina2013liti

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-02-25 08:53:10
使细菌尽量均匀分布于黑色膜上，黑色膜一般使用25mm的好像，

显微镜下的视野面积可以从物镜的型号得知，

数显微镜视野下的菌数，变化视野，再数，至少数10个视野以上，取平均值，

然后通过一个系数换算出膜 ...

请问，我想做活性炭上面的微生物量，混合种群的，用DAPI染色好呢，还是LIVE/DEAD好，哪个经济些
赞一下 回复此楼
7楼2013-12-08 11:50:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XXH_QB

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by tina2013liti at 2013-12-08 11:50:56
请问，我想做活性炭上面的微生物量，混合种群的，用DAPI染色好呢，还是LIVE/DEAD好，哪个经济些...

LIVE/DEAD包括PI 和DAPI
赞一下 回复此楼
8楼2013-12-08 15:28:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by tina2013liti at 2013-12-08 11:50:56
请问，我想做活性炭上面的微生物量，混合种群的，用DAPI染色好呢，还是LIVE/DEAD好，哪个经济些...

效果是LIVE/DEAD好，DAPI染色肯定经济，DAPI染色我试过几次，可能因为自己技术不过关，都没成功，后来用了是LIVE/DEAD，就再也没有其他的了
赞一下 回复此楼
环境卫生、微生物学、卫生应急
9楼2013-12-08 16:12:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 XXH_QB 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +23 低垂的野花 2026-07-31 31/1550 2026-08-07 12:22 by speculiar
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode变化情况 +3 布布和一二 2026-08-07 9/450 2026-08-07 12:19 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +3 yang182083 2026-08-06 4/200 2026-08-07 11:07 by 虫友是什么虫
[基金申请] 基金中了 +11 laoda193707 2026-08-06 11/550 2026-08-07 10:54 by TT和NN
[基金申请] 听说今天filecode变了 +21 布布和一二 2026-08-06 44/2200 2026-08-07 10:11 by 布布和一二
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +4 archvillain 2026-08-06 8/400 2026-08-07 08:06 by 带你看大海
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 6/300 2026-08-06 20:19 by 苏知砚
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭