水样一般用3um,0.2um膜过滤即可。双层滤膜没必要吧，要看你的实验目的是什么，一般细菌直径稍大。微生物提取出来放于-80冰箱，除非你是特殊的菌，加了保护剂，否则是不能活化。

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2楼: Originally posted by 梧桐清雨 at 2019-10-15 08:14:01
水样一般用3um,0.2um膜过滤即可。双层滤膜没必要吧，要看你的实验目的是什么，一般细菌直径稍大。微生物提取出来放于-80冰箱，除非你是特殊的菌，加了保护剂，否则是不能活化。
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感谢！是直接连着滤膜放进冰箱保存？那后期如何将滤膜上的细菌转移到培养基里筛选培养呢？我目前是想从环境样品（主要是水样）中筛选出可培养的细菌，希望指教。。谢谢！

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3楼: Originally posted by Nia_ at 2019-10-15 08:57:08
感谢！是直接连着滤膜放进冰箱保存？那后期如何将滤膜上的细菌转移到培养基里筛选培养呢？我目前是想从环境样品（主要是水样）中筛选出可培养的细菌，希望指教。。谢谢！...

你从水样筛菌，直接把水样加入到液体培养基，培养出菌悬液之后，再用固体培养基来涂布不就可以了吗？

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4楼: Originally posted by larallian at 2019-10-15 09:44:53
你从水样筛菌，直接把水样加入到液体培养基，培养出菌悬液之后，再用固体培养基来涂布不就可以了吗？...

谢谢！但是为了防止筛不出来，我是想把所有微生物都提取出来放在-80保存，再拿出来一一筛选。还是说，水样本身包括里面的菌群可以共同保存相当一段时间？取样地可能比较远。或者，像您说的，可不可以先在液体培养基中直接扩培，再后续保存在甘油里放-80长期保存菌种？（小白第一次做微生物，其实怕的是水样里的微生物浓度太低长不出来，所以想先浓缩一下，有什么建议吗？）

很多文献中都有从环境中筛选微生物的，可以先用液体培养基富集微生物，然后再用固体培养板分离纯化微生物。

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6楼: Originally posted by 梦幻太初 at 2019-10-16 08:24:04
很多文献中都有从环境中筛选微生物的，可以先用液体培养基富集微生物，然后再用固体培养板分离纯化微生物。

感谢！有此想法，正想确认一下，谢谢您！

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5楼: Originally posted by Nia_ at 2019-10-15 17:13:34
谢谢！但是为了防止筛不出来，我是想把所有微生物都提取出来放在-80保存，再拿出来一一筛选。还是说，水样本身包括里面的菌群可以共同保存相当一段时间？取样地可能比较远。或者，像您说的，可不可以先在液体培养基 ...

水里微生物的确相对来说较少，你可以投加进液体培养基的比例多一些，一般来说条件适宜的情况下，菌都会长得比较多也比较快。然后你再把菌悬液涂布，划线，最后分离出来的单菌落就是你需要的菌。再把菌斜面保存就行了。斜面保存4℃能保存半年，半年后再转接就行。而且你在不停的做实验的时候，都需要培养出菌悬液，投加到你需要处理的体系里。每次摇出来的菌悬液可以再涂布划线，这样你的菌总会不断的有。你存-80，你用的时候活化还得活化一定时间呢，没这个必要
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