微量细胞提取RNA，trizol保存，如何合并提取
我有个问题请教一下提取方面专家：
细胞数量是10^4数量级，每管是500ul左右透明的trizol保存，提取的时候觉得提取的RNA量达不到建库要求（按照每个细胞10pg的RNA量算，10^4级别细胞含的RNA达不到1ug建库起始量），所以将多达12管合并提取。
提取的时候我把trizol转管了，用康为试剂盒，加氯仿吸上清加等体积70%乙醇，过柱子提取。检测结果总量达不到100ng。
请教各位虫友，哪里做错了吗？
我知道每一步都有核酸损失，那是不是因为损失的量达到了2微克，所以提取失败？
有没有很好的解决这种问题的方案呢？？？
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京公网安备 11010802022153号
细胞为啥用氯仿，我喜欢用试剂盒，提的纯度也高，丢失的也少
Roche试剂盒挺好用的
细胞+trizol，送到我手中就是加完TRIZOL的样本，我只能这么做
，
在我手里还有QIAGEN的盒子，我选了康为的盒子。。
有微量提取试剂盒
通常Trizol和全血样本的比例是1:1，也可以稍多加一些Trizol，少加些血。混匀之后放置10分钟左右，直接加三氯甲烷混匀再去离心，可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷。我们实验室用BIODAI离心技术提取RNA比Trizol要简便些,楼主需要注意如果用Trizol每个步骤操作要快，用的时间药短些，防止RNA降解,异丙醇沉淀的时候，放-20°C的冰箱半个小时，或再适当延长一点时间。