绝对定量PCR的扩增效率要达到多少呢？看有的说要90%-110%，有的说是相对定量的扩增效率是90%-110%，可是我现在斜率都在-4.0左右，斜率大概75%，试了降低退火温度，提高复性和延伸时间，还提高了引物浓度，建标曲的时候不同浓度的模板Ct值整体降低，但是delta Ct值没啥变化，相当于我的标曲斜率没啥变化。
       问题1：为什么我尝试的提高扩增效率的方法，可是delta Ct没啥变化呢？是我理解错它们之间的关系了吗
     问题2：还想问下小伙伴儿们做qPCR的时候低浓度模板和阴性的重现性不好，遇到这种问题大家都是怎么解决的呢？
请求各位大神们多多指教啦～

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