[求助] 抗体与核酸共价连接，sulfo-SMCC做交联剂已有1人参与

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有138人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

1楼2017-10-02 20:04:44

眼睛儿

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1232.9
散金: 50
红花: 2
帖子: 229
在线: 54小时
虫号: 5266881
注册: 2016-11-21
性别: GG
专业: 无机纳米化学

你这个电泳跑的漂亮

发自小木虫Android客户端

2楼2017-10-02 20:19:54

petty04

新虫 (职业作家)

应助: 17 (小学生)
金币: 749.6
散金: 445
红花: 6
帖子: 3999
在线: 146小时
虫号: 4520916
注册: 2016-03-19
性别: GG
专业: 生物化学

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-10-02 23:25:52

产生抗体与抗体的偶联应该是不可避免的，可能你需要计算好蛋白和核酸的摩尔比，用摩尔比远过量的巯基核酸做反应试试看，应该会一定程度上降低蛋白之间的偶联。另外，反应时尽量把蛋白调到较低浓度，降低蛋白互相之间碰撞偶联的几率

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

sysg07124

3楼2017-10-02 20:32:51

minecat

木虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 3554
红花: 1
帖子: 30
在线: 32.9小时
虫号: 674148
注册: 2008-12-13
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

全程在缓冲液中加入螯合剂EDTA试试。

发自小木虫Android客户端

4楼2017-10-02 20:42:32

sysg07124

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 859.5
散金: 204
帖子: 42
在线: 14.9小时
虫号: 3279962
注册: 2014-06-18
专业: 生物物理、生物化学与分子

送红花一朵

引用回帖:

3楼: Originally posted by petty04 at 2017-10-02 20:32:51
产生抗体与抗体的偶联应该是不可避免的，可能你需要计算好蛋白和核酸的摩尔比，用摩尔比远过量的巯基核酸做反应试试看，应该会一定程度上降低蛋白之间的偶联。另外，反应时尽量把蛋白调到较低浓度，降低蛋白互相之间 ...

抗体与SMCC反应的时候还没有加核酸，所以应该不是抗体和核酸的比例问题吧。我想过稀释抗体，但是抗体与SMCC反应之后我是用一个最大上样量12微升的脱盐柱除过量SMCC的，如果稀释太多实验的成本上耗不起啊
另外我想问一下，你知道为什么如果SMCC先和氨基的DNA反应，除盐之后再与抗体孵育，理论上不是也可以吗，为什么我的电泳显示一点也没有标上去？如果SMCC能让这个抗体产生这么严重的交联，它表面的巯基应该挺多的吧？

发自小木虫IOS客户端

5楼2017-10-02 20:58:40