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巯基DNA修饰纳米金相关问题(求做过的大神进)!

作者 ruiduidui
来源: 小木虫 1200 24 举报帖子
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我现在在做巯基化DNA修饰纳米金,出现了一些问题,求各位大神相助
首先我描述一下我的实验过程:
15nm的胶体金(4.5ml)和20umol(2nmol)的ssDNA避光50℃,150rpm孵育22h,之后转移到0.5ml磷酸缓冲液(pH8,0.1M含0.1%SDS)中同样条件孵育10min,之后用含有2M NaCl的PBS缓冲液(0.01M,pH8,0.01%SDS)进行加盐老化,每隔10min(50℃,150rpm孵育)加一次,前两次每次加0.05M,之后每次增加0.1M,直到最终NaCl浓度达到1M为止。加完后再以同样的条件孵育四小时,再离心。

我的问题是加NaCl到1M时胶体金都没有出现什么变化,但是再孵育四小时后,胶体金的红色基本消失,出现许多絮状沉淀

之前第一次做的时候并没有出现此问题,只是离心后重悬不完全,后来几次都出现了上述这个问题,我的ssDNA是在上海金标合成的,第一次做的时候是现用现稀释的,后来两次做的时候都是之前第一次稀释后剩下的,请问是否跟这个有关系呢?(我的DNA没有经过TCEP处理,因为我看很多人说不用处理也可以)如果用TCEP处理条件是什么呢?(TCEP浓度,比例等等) 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • ruiduidui

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  • ruiduidui

    求做过大神帮助啊

  • ruiduidui

    顶顶顶,求回复呀

  • ruiduidui

    没有做过的人吗

  • consequently

    这个问题确实不太好解决。。加盐处理很容易沉淀,我以前做也没做出来,就放弃了。。。最近有一篇JACS是关于怎么在金颗粒上修饰巯基DNA,很简单,很有趣,我没试过,不过你也许可以试试看。。。Freezing Directed Construction of Bio/Nano Interfaces: Reagentless Conjugation, Denser Spherical Nucleic Acids, and Better Nanoflares,

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