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求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验

作者 大头妞妞: 来源: 小木虫 400 8 举报帖子

求师兄师姐指教，
我的问题是这样的：做的是SYBR-Green1荧光定量PCR试验，原理我都看了，但是看到最后并不知我的未知样品具体怎么测，我自己的理解是，待我将我所有的QPCR反应体系和程序都优化后（标准曲线OK，标准品重复试验OK，引物特异性QPCR检测OK），那么我就将我的未知样品稀释后与我的标准品一起放在定量PCR仪上反应是吗(PS,未知样品稀释的范围在标准品之内)，是这样吗，？？？？返回小木虫查看更多

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精华评论

seascen2016

差不多，不过未知样本稀释是什么鬼？你知道怎么稀释能在标曲内?
贾子阳009

你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！
大头妞妞

引用回帖:
4楼: Originally posted by 贾子阳009 at 2017-02-17 18:05:18
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

谢谢指教，清楚了
wsy0914

引用回帖:
5楼: Originally posted by 大头妞妞 at 2017-02-17 21:30:33
谢谢指教，清楚了...

标准曲线怎么做？我那个扩增率只有80%，怎么改进？求指导
林志遥-14

理解的基本正确，可以做一次试试了
大头妞妞

引用回帖:
6楼: Originally posted by wsy0914 at 2017-02-19 09:50:33
标准曲线怎么做？我那个扩增率只有80%，怎么改进？求指导...

可以问一下你的PCR反应体系都是怎么摸索的吗，我的一对95bp的引物怎么都没弄出来，求指教，要不建议，可以加你QQ私聊吗
，