HPLC测定单糖组成出现杂峰,求助!!
PMP柱前衍生法测定单糖组成。
一批做了4个糖的,有两个多糖出现了标准品中没有的峰。其它两个多糖测定结果正常。
请教一下大家,大概是什么原因呢?
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PMP柱前衍生法测定单糖组成。
一批做了4个糖的,有两个多糖出现了标准品中没有的峰。其它两个多糖测定结果正常。
请教一下大家,大概是什么原因呢?
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前两个出现杂峰的话,有可能是以前实验的东西残留在管里
我也刚做完单糖组成,也是PMP衍生化的,没有出现楼主这个问题,建议重新做一次试试
另外两个糖衍生成功也跑出来了,说明方法没问题,流动相也是可以的,很有可能就像上面虫友说的那样所用的容器被污染了。我们实验室也衍生过很多次多糖的,建议您重新衍生吧。
做了3次了,都是这两个样品会出现杂峰,其它样品都正常。
谢谢您!重复做过好几次,应该不是这个原因。
一般来说,如果不是溶剂峰的话,多数情况为杂质,建议重做,多冲两遍柱子
首先,我建议你使用PMP衍生完成后,将PH调至中性,这样前面的PMP的峰就会消失或者减小了,你现在的PMP的峰太高了,可能会掩盖样品中的一些信号。再次,关于出现标准品中没有出现的峰,我觉的结果没错,可能只是你的标准品不够多,比如说,在鼠李糖和葡萄糖之间还存在葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸,在甘露糖和鼠李糖之间还存在氨基葡萄糖,在半乳糖醛酸和葡萄糖之间还存在氨基半乳糖等,因为,你的图谱中,即使出现了未知峰,但有些峰跟标准品是很好吻合的,所以实验过程应该没有问题,你只需要在多加几种标准品,