请大神解答TMB和辣根过氧化物酶的作用机理?做ELISA时,一般先加过氧化氢,再加TMB,顺序能否调过来? 显色后为什么颜色会变?发生了哪些化学反应? 返回小木虫查看更多
我们在做TMB显色是都是配置好A液与B液,在使用时取等量A和B混合后加到96孔板里,之后加终止液。在配制A和B时先用甲醇溶解TMB.
辣根过氧化物酶与过氧化氢反应释放氧自由基,然后氧自由基与TMB显色底物发生反应,显色后会变蓝,加入1NHcl终止后变黄,染后可拿去酶标仪读数
已找到正确答案,不用再回答了,谢谢!
前辈,打扰了,我有一个问题,请问为什么必须加入TMB呢,是因为要显色是么
我们在做TMB显色是都是配置好A液与B液,在使用时取等量A和B混合后加到96孔板里,之后加终止液。在配制A和B时先用甲醇溶解TMB.
辣根过氧化物酶与过氧化氢反应释放氧自由基,然后氧自由基与TMB显色底物发生反应,显色后会变蓝,加入1NHcl终止后变黄,染后可拿去酶标仪读数
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请问一下,我是新手,我在做过氧化氢酶模拟物,一种复合材料,用它传感过氧化氢,我是先在缓冲溶液中加入TMB,再加入H2O2,然后加入材料,反应几分钟后拿到紫外去测量吸光度,没有加入终止剂,所以测量时间要求很严格,不太好控制,怎么办?那如果我加了终止剂盐酸后,和HRP一样要在450nm处侧吸光度么?
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前辈,打扰了,我有一个问题,请问为什么必须加入TMB呢,是因为要显色是么