【求助/交流】请问发酵罐发酵会导致重组蛋白降解吗?如何处理呢?
高手求教:我们发现毕赤酵母的重组蛋白在发酵罐中,发现正常大小的重组蛋白被切除了约10k Da的片段,而且随着诱导时间加长,降解情况更厉害,最后导致小片段占主导,这是为什么?这是否也是导致酶活不高的原因,如何验证和解决呢?
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高手求教:我们发现毕赤酵母的重组蛋白在发酵罐中,发现正常大小的重组蛋白被切除了约10k Da的片段,而且随着诱导时间加长,降解情况更厉害,最后导致小片段占主导,这是为什么?这是否也是导致酶活不高的原因,如何验证和解决呢?
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不太清楚楼主的情况,不知道及时收获是否可以达到目的。
基本上有两个方法:
1 选用蛋白酶缺陷性酵母,
2 修饰重组蛋白去掉蛋白酶位点,
具体有哪些蛋白酶缺陷型酵母?如何分析重组蛋白的蛋白酶位点呢?