24小时热门版块排行榜    

查看: 2162  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

喝茶的面包

银虫 (初入文坛)


[求助] PCR凝胶电泳图求助 已有2人参与

自己设计的引物,PCR过后凝胶电泳,拍出来的图如附件,最右边没有加DNA模板,用DEPC处理水代替的,请问跑出来的条带是非特异性扩展的产物吗?

PCR凝胶电泳图求助
PCR.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大海一孤舟

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-15 22:31:10
连水都有条带,要不就是水污染了模板,要不就是实验出现了错误;
如果排除以上的可能性,那就是引物自身的扩增,可以考虑更换引物。
3楼2016-01-15 16:21:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

奇怪人生123

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-01-15 22:30:56
看了你的电泳图,听了你的描述,有疑问:1.你说用DEPC水作为模板的阴性对照,位置具体是哪一电泳道?最后在电泳图上标明。(直说最右边真不清楚你说的是哪一个)2.你的目的条带是多大的?
看电泳图,中间有一条比较亮的条带,似乎是你的目的条带。同时,也有许多杂带(非特异性条带),怀疑与PCR时退火温度的选择有关。
实时荧光定量PCR(TaqMan探针法)欢迎和大家探讨~
2楼2016-01-15 16:20:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

喝茶的面包

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 奇怪人生123 at 2016-01-15 16:20:46
看了你的电泳图,听了你的描述,有疑问:1.你说用DEPC水作为模板的阴性对照,位置具体是哪一电泳道?最后在电泳图上标明。(直说最右边真不清楚你说的是哪一个)2.你的目的条带是多大的?
看电泳图,中间有一条比较 ...

你好,DEPC水作为模板的阴性对照是在泳道5,采用MarkⅡ作为参照,目的产物的大小根据基因库里下载的序列算出来理论值为198bp(是否准确还有待验证),退火温度为65℃。请问,中间的条带不是引物二聚体吧?
PCR凝胶电泳图求助-1
PCR.jpg

4楼2016-01-15 19:34:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

喝茶的面包

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 大海一孤舟 at 2016-01-15 16:21:08
连水都有条带,要不就是水污染了模板,要不就是实验出现了错误;
如果排除以上的可能性,那就是引物自身的扩增,可以考虑更换引物。

引物是自己设计的简并引物,更换引物的话,需要花费很多精力,所以需要确定具体哪里出问题了,DEPC处理水,我再做次实验验证一下。
5楼2016-01-15 19:36:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +8 documentary 2026-08-10 8/400 2026-08-10 19:20 by loufangrui
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +14 Lanmanbaby 2026-08-09 22/1100 2026-08-10 14:57 by wwncly
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见