应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教DGGE电泳图
81/1返回列表
查看: 2158  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉

[交流] 【求助/交流】请教DGGE电泳图 已有7人参与

我跑的这是土壤中放线菌的DGGE电泳，条件如下：6%的丙烯酰胺凝胶；45%-60%的变性梯度；放线菌PCR片段：433bp；电压：70V；电泳时间：14h；电泳液：1×TAE。
整体和局部电泳图如下所示，请大家讨论以下，如何改进，才能跑出好的电泳图来，先谢谢大家了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-10 09:44:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evebobo

铜虫 (小有名气)
★
看天(金币+1):鼓励 2010-08-11 11:41:06
胶配的不好  条带跑弯了 没在一条直线上 可以扩大下梯度范围 6%的胶不碎吗？ 我做过6。5%  基本染色完就碎了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-08-10 11:33:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):good！ 2010-08-10 12:53:11
原因是多方面的
1 PCR产物是否能够满足DGGE实验条件。条带扩增单一，浓度高。
2 DGGE凝胶配置合格：变性梯度合理，胶浓度合适，各试剂最好选择进口产品。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-08-10 11:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fang8596

金虫 (小有名气)
边缘效应。跟电泳槽也有关系吧～
赞一下 回复此楼
4楼2010-08-10 16:08:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

希望之光

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+5):新人鼓励 常来 2010-08-11 11:41:25
好像是电泳仪的问题 还有TE加多了
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-08-10 16:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jndxmmc

新虫 (小有名气)

关于DGGE

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+5):鼓励新人交流 2010-08-11 11:41:38
DGGE我做过 结果还不错 以下是我的操作 你看看 希望对你有帮助
（1）变性胶的制备：变性剂浓度范围为30%~60%（100%的变性剂为7mol/L的尿素和40%的去离子甲酰胺的混合物），胶浓度为8%，变性剂的浓度从上向下递增。
(2) PCR样品的加样：在每个加样孔加入含有10%的加样缓冲液的PCR样品20μl。
(3) 电泳及染色：150V，60℃电泳5h。电泳完毕后，将凝胶在SYBR Green I中染色约30min。

个人感觉 跑胶的时间没必要那么长，胶浓度8%就行 再低的不坚韧，除此之外就是你的PCR产物是否理想
赞一下(3人) 回复此楼
6楼2010-08-11 11:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉
引用回帖:
Originally posted by jndxmmc at 2010-08-11 11:07:37:
DGGE我做过 结果还不错 以下是我的操作 你看看 希望对你有帮助
（1）变性胶的制备：变性剂浓度范围为30%~60%（100%的变性剂为7mol/L的尿素和40%的去离子甲酰胺的混合物），胶浓度为8%，变性剂的浓度从上向下递增 ...

非常感谢
回复此楼
7楼2010-08-11 16:44:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

virgo沙加

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
跑弯了应该是电压过大~
赞一下 回复此楼
8楼2012-07-23 23:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 clearth 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 10:39 by 3OOjAIS77qg2
[基金申请] fileCode有新解读？ +8 Tide man 2026-08-08 16/800 2026-08-08 09:59 by Tide man
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:27 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:21 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭