应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】[附图]土壤放线菌PCR老扩得不理想，大家给支支招吧
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 1116  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉

[交流] 【求助/交流】[附图]土壤放线菌PCR老扩得不理想，大家给支支招吧 已有5人参与

土壤放线菌PCR扩得不理想，在目标条带处，会出现两条带。大家给支支招吧

电泳检测图片，实验室没有凝胶成像系统，只能用相机拍了……


反应程序


反应体系




[ Last edited by clearth on 2010-12-11 at 20:02 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-10 11:06:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinsongna

金虫 (正式写手)
米有扩过土壤真菌。。但是做过很多PCR  找个内参基因 看看是不是模板的问题吧
赞一下 回复此楼
2楼2010-12-10 11:15:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉
引用回帖:
Originally posted by yinsongna at 2010-12-10 11:15:33:
米有扩过土壤真菌。。但是做过很多PCR  找个内参基因 看看是不是模板的问题吧

抱歉是放线菌……………………
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-11 17:11:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~ 2010-12-11 23:41:23
提高一下退火温度，做个touch down试一下，祝你好运。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-12-11 18:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉
引用回帖:
Originally posted by yuanbo934 at 2010-12-11 18:47:10:
提高一下退火温度，做个touch down试一下，祝你好运。

谢谢啊
回复此楼
5楼2010-12-11 19:53:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
以前曾经扩细菌的16s，引物酶bfr啥的都没问题，但是扩出来就是两条带。。。
不管了，直接连~
结果，测序出来，没什么异常
lz可以借鉴一下
赞一下(1人) 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
6楼2010-12-12 00:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉
引用回帖:
Originally posted by scelab at 2010-12-12 00:22:28:
以前曾经扩细菌的16s，引物酶bfr啥的都没问题，但是扩出来就是两条带。。。
不管了，直接连~
结果，测序出来，没什么异常
lz可以借鉴一下

我这个不是连接转化，是上DGGE，我担心分离的不好
赞一下 回复此楼
7楼2010-12-12 10:09:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在雨中

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
退火温度高了吧?还有50微升体系,模板加0.5?是不是少了?
我一般加1-2微升.
放线菌没有做过.细菌,真菌做的很熟.退火温度55-56°都蛮好的呀.为何取这么高,你
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-12-12 13:45:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉
引用回帖:
Originally posted by 在雨中 at 2010-12-12 13:45:22:
退火温度高了吧?还有50微升体系,模板加0.5?是不是少了?
我一般加1-2微升.
放线菌没有做过.细菌,真菌做的很熟.退火温度55-56°都蛮好的呀.为何取这么高,你

因为DNA合成单上报告两条引物的Tm分别是68.8°和52.18°,（68.8°+52.18°）/2=60.5°，我是这么算的
赞一下 回复此楼
9楼2010-12-12 20:03:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 clearth 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 工科08-机械专硕-求调剂 +3 雷欧飞踢 2026-04-02 3/150 2026-04-05 18:49 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358求调剂 +4 cs0106 2026-04-04 4/200 2026-04-05 18:46 by imissbao
[考研] 材料0856 英一数二 323 求调剂 +14 袁sy 2026-04-01 14/700 2026-04-05 18:18 by cql1109
[考研] 材料专硕 调剂 +14 CXN123456 2026-04-03 14/700 2026-04-05 17:18 by Hdyxbekcb
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:06 by imissbao
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-03 4/200 2026-04-04 22:17 by hemengdong
[考研] 材料科学与工程调剂 +19 深V宿舍吧 2026-03-30 20/1000 2026-04-04 22:13 by hemengdong
[考研] 调剂 +4 是可乐不是可乐 2026-04-04 4/200 2026-04-04 19:41 by 唐沐儿
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 22408，264求调剂 +3 ywh729 2026-04-03 4/200 2026-04-04 11:04 by ywh729
[考研] 26调剂 086003 +6 失活的细胞 2026-04-04 6/300 2026-04-04 09:50 by zhangdingwa
[考研] 282求调剂 不挑专业 求收留 +7 Yam. 2026-03-30 8/400 2026-04-03 14:12 by zhangdingwa
[考研] 一志愿深大085601材料工程专业（专硕）300分可以调剂去哪 +8 10160315 2026-04-02 8/400 2026-04-03 09:36 by hypershenger
[考研] 一志愿a区211，085601-307分求调剂 +13 党嘉豪 2026-03-31 26/1300 2026-04-03 08:33 by 495374996
[考研] 312求调剂 +4 赊月色 2026-04-02 5/250 2026-04-03 08:21 by fangshan711
[考研] 求调剂，一志愿北林食品与营养095500，301分，已过六级，有科研经历 +4 快乐储蓄罐 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135，现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭