应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】[附图]土壤放线菌PCR老扩得不理想，大家给支支招吧
51/1返回列表
查看: 1352  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉

[交流] 【求助/交流】[附图]土壤放线菌PCR老扩得不理想，大家给支支招吧 已有5人参与

土壤放线菌PCR扩得不理想，在目标条带处，会出现两条带。大家给支支招吧

电泳检测图片，实验室没有凝胶成像系统，只能用相机拍了……


反应程序


反应体系




[ Last edited by clearth on 2010-12-11 at 20:02 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-10 11:06:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉
引用回帖:
Originally posted by 在雨中 at 2010-12-12 13:45:22:
退火温度高了吧?还有50微升体系,模板加0.5?是不是少了?
我一般加1-2微升.
放线菌没有做过.细菌,真菌做的很熟.退火温度55-56°都蛮好的呀.为何取这么高,你

因为DNA合成单上报告两条引物的Tm分别是68.8°和52.18°,（68.8°+52.18°）/2=60.5°，我是这么算的
赞一下 回复此楼
9楼2010-12-12 20:03:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

yinsongna

金虫 (正式写手)
米有扩过土壤真菌。。但是做过很多PCR  找个内参基因 看看是不是模板的问题吧
赞一下 回复此楼
2楼2010-12-10 11:15:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉
引用回帖:
Originally posted by yinsongna at 2010-12-10 11:15:33:
米有扩过土壤真菌。。但是做过很多PCR  找个内参基因 看看是不是模板的问题吧

抱歉是放线菌……………………
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-11 17:11:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~ 2010-12-11 23:41:23
提高一下退火温度，做个touch down试一下，祝你好运。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-12-11 18:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖？ +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +15 羊腰板 2026-08-21 16/800 2026-08-23 10:45 by process2012
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭