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clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉

[交流] 【求助/交流】[附图]土壤放线菌PCR老扩得不理想,大家给支支招吧 已有5人参与

土壤放线菌PCR扩得不理想,在目标条带处,会出现两条带。大家给支支招吧

电泳检测图片,实验室没有凝胶成像系统,只能用相机拍了……


反应程序


反应体系




[ Last edited by clearth on 2010-12-11 at 20:02 ]
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在雨中

金虫 (著名写手)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
退火温度高了吧?还有50微升体系,模板加0.5?是不是少了?
我一般加1-2微升.
放线菌没有做过.细菌,真菌做的很熟.退火温度55-56°都蛮好的呀.为何取这么高,你
8楼2010-12-12 13:45:22
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查看全部 9 个回答

yinsongna

金虫 (正式写手)

米有扩过土壤真菌。。但是做过很多PCR  找个内参基因 看看是不是模板的问题吧
2楼2010-12-10 11:15:33
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clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉

引用回帖:
Originally posted by yinsongna at 2010-12-10 11:15:33:
米有扩过土壤真菌。。但是做过很多PCR  找个内参基因 看看是不是模板的问题吧

抱歉是放线菌……………………
3楼2010-12-11 17:11:36
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yuanbo934

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~ 2010-12-11 23:41:23
提高一下退火温度,做个touch down试一下,祝你好运。
4楼2010-12-11 18:47:10
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