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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr电泳有两条带
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amberhwk

新虫 (小有名气)

[求助] pcr电泳有两条带 已有2人参与

一一条是我要的目的条带900bp一条差不多100左右，一个月前刚做过，并没有这种情况，模版引物条件都一样

pcr电泳有两条带


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1楼 2016-01-06 09:51:45
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fengshen2005

银虫 (正式写手)
引物加多了吧

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2楼2016-01-06 11:09:23
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喝燕麦片

新虫 (小有名气)
引物二聚体

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奋斗是个人的
3楼2016-01-06 11:10:34
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amberhwk

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 喝燕麦片 at 2016-01-06 11:10:34
引物二聚体

这个是怎么造成的，怎么比目的条带还亮

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4楼2016-01-06 12:43:00
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amberhwk

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fengshen2005 at 2016-01-06 11:09:23
引物加多了吧

20微升体系，引物模版都是1

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5楼2016-01-06 12:43:26
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zhangquan084

木虫 (正式写手)
质粒模板浓度太高了

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生而不息，奋斗不止！
6楼2016-01-06 13:34:52
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Esther_zhang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by amberhwk at 2016-01-06 12:43:26
20微升体系，引物模版都是1
...

引物浓度是不是太大了。你可以做几管平行对照，看看是引物浓度还是模板浓度太大了，或是退火温度提升几度看看。
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7楼2016-01-06 16:34:52
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hcf321283

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amberhwk: 金币+1, ★有帮助 2016-01-21 10:07:16
把你的义务稀释20倍在PCR一次试试看，亮成这个样子的引物二聚体，我都怀疑你是用100P的引物母液！
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8楼2016-01-06 16:40:50
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amberhwk

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hcf321283 at 2016-01-06 16:40:50
把你的义务稀释20倍在PCR一次试试看，亮成这个样子的引物二聚体，我都怀疑你是用100P的引物母液！

应该是引物二聚体，我扩大体系试试

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9楼2016-01-06 19:20:40
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喝燕麦片

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by amberhwk at 2016-01-06 12:43:00
这个是怎么造成的，怎么比目的条带还亮
...

引物加多了

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奋斗是个人的
10楼2016-01-06 19:26:08
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