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western blot出现很多杂带，求助，交流？谢谢已有2人参与
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SDS-PAGE有三条带，western blot刚开始用5%脱脂奶粉封闭2h； 一抗HIS 1:1000，2h；二抗羊抗兔1:5000，2h；洗涤用TBST 5X5min，出现超多的杂带，降低一抗（1:3000）、二抗（1:10000）的浓度后从一束的杂带到只剩三条杂带，而且大小偏大，目的蛋白加上his应该在20KDa左右，但现在出现的三条都是偏大的，有没有战友做过啊？改怎么去调整比较好呢？谢谢啦（表达载体是pET28a+） SDS-PAGE.jpg  很多杂带.jpg  连对照都出现了.jpg  这是调整抗体浓度后的.jpg |
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