| 查看: 1269 | 回复: 4 | |||
rabbitzumi铜虫 (小有名气)
|
[交流]
问一个关于荧光实时定量PCR的问题 已有2人参与
|
|
最近在线设计了一对引物，合成回来做了个预实验，大鼠的TNFa, 反应体系如下： 2* UltraSYBR Mix : 12.5 uL Forward primer: 0.5 uL(Final concentration: 200 nM) Reverse primer: 0.5 uL(Final concentration: 200 nM) Template DNA: 1 uL RNase free water: 10.5 uL 总反应体系为 25 uL. 上下游引物的退火温度分别为：48.7 和46.6 度。 反应条件也基本按照试剂盒说明: 预变性 95度 10min 变性 95度 15 s 退火/延伸 48度 1 min 变性和退火/延伸 共计循环 40次 溶解曲线分析：参照仪器默认设定 下面是我的实验结果： 我的问题是：扩增曲线怎么会是负值？  realtime PCR.png |
回复此楼» 猜你喜欢
听说今天filecode变了
已经有34人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
基金中了
已经有6人回复
-
filecode
已经有14人回复
-
固定端突然变了，今天
已经有7人回复
-
filecode
已经有11人回复
-
大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑
已经有6人回复
-
一个有机合成实验室都需要哪些设备？
已经有12人回复
-
求各位大神看下
已经有33人回复
-
咨询面上基金
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量PCR内参问题
已经有3人回复
- 关于荧光定量标准偏差问题
已经有5人回复
- 求助，实时荧光定量PCR没有CT值，如下图
已经有16人回复
- 荧光定量PCR中，结果内参基因的CT值有，但是目的基因的CT值没有，怎么办
已经有20人回复
- 荧光定量Pcr问题求助
已经有7人回复
- 新手做荧光定量PCR几个疑问求解答！！
已经有13人回复
- 请教荧光定量PCR结果图？我的这张能看出来什么问题？
已经有24人回复
- 荧光定量PCR数据处理——SD值及方差分析
已经有5人回复
- 荧光定量PCR溶解曲线问题
已经有8人回复
- 关于荧光定量PCR引物设计的问题
已经有7人回复
- 求教，荧光定量PCR标曲问题
已经有16人回复
- 荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么?
已经有15人回复
- 实时荧光定量pcr，cDNA的加入量会影响结果的准确度吗？
已经有24人回复
- 实时荧光定量PCR过程问题
已经有11人回复
- 为什么荧光定量PCR扩增曲线呈倒S型
已经有27人回复
- 请教PCR高手，使用SYBR Green I法进行荧光定量PCR对于产物大小有什么要求？
已经有21人回复
- 求解：实时荧光定量PCR奇峰
已经有18人回复
- 合适的荧光定量PCR管
已经有11人回复
- 定量PCR读取荧光值的步骤需要保持多长时间？
已经有12人回复
- 荧光定量PCR的模板浓度
已经有12人回复
- 荧光定量PCR-最全的疑难问题解答！！！
已经有294人回复
- 【求助/交流】关于做荧光定量pcr的模板问题
已经有12人回复
王彬2014
银虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 229.6
- 帖子: 117
- 在线: 26.7小时
- 虫号: 3607655
- 注册: 2014-12-22
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
2楼2015-06-18 08:22:25
3楼2015-06-18 10:43:12
rabbitzumi
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 211.3
- 散金: 2
- 红花: 4
- 帖子: 180
- 在线: 102.2小时
- 虫号: 832452
- 注册: 2009-08-22
- 性别: MM
- 专业: 药物设计与药物信息
4楼2015-06-24 19:40:14
rabbitzumi
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 211.3
- 散金: 2
- 红花: 4
- 帖子: 180
- 在线: 102.2小时
- 虫号: 832452
- 注册: 2009-08-22
- 性别: MM
- 专业: 药物设计与药物信息
5楼2015-06-24 19:40:56
50