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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取电泳图，不知道什么原因。求原因
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308047410

新虫 (小有名气)

[求助] RNA提取电泳图，不知道什么原因。求原因

采用Trizol试剂（Invitrogen，USA）提取各组织总RNA。
1）  用液氮将研钵预冷，待液氮挥发速度变慢，取适量消化腺组织（约 50mg）
放入其中，研磨组织；
2）  待样品无明显颗粒后转入已加入 1mlTrizol 的 1.5ml 离心管中，混匀后，室
温静置 10min；
3）  在管中加入 200μl 三氯甲烷，用涡旋震荡器剧烈震荡 15s 后，冰上静置 5min；
4）  以 12,000 rpm 转速 4℃冷冻离心 15min 后，弃上清液，加入与上清液等量的
异丙醇，迅速混匀；
5）  12,000 rpm 4℃冷冻离心 20min；
6）  弃去上清液，加入 1ml 75%乙醇（现用现配），8000rpm 4℃冷冻离心 10min；
7）  弃掉上清液，然后将沉淀置于室温晾干 5-10min，使残余乙醇尽可能挥发，
取事先预热 DEPC-H2O，取 30μl 溶解 RNA 沉淀。
以上是我采用 的方法，得到的电泳图如下：
由于第一次做，请各位给予指导和 建议。

RNA提取电泳图，不知道什么原因。求原因
Cache_50175fbd4703b621.jpg
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1楼 2015-06-08 12:04:04
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xiaoyangren7

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
取事先预热 DEPC-H2O？要预冷的DEPC水吧，建议整个过程冰上操作，天气热的情况下，室温晾干那一步要注意，久了RNA就降解了，样品多来不及可以把晾干的先全部加了水再慢慢混匀
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8楼2015-06-10 08:50:44
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ThinkerDay

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
308047410: 金币+2, ★有帮助 2015-06-10 23:43:28
电泳时间多少，凝胶浓度多少？

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-06-08 13:30:37
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ThinkerDay

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

marker是多少的？

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-06-08 13:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

308047410

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ThinkerDay at 2015-06-08 13:30:37
电泳时间多少，凝胶浓度多少？

电泳时间：10分钟，marker：2000的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-08 21:49:30
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