应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA 提取后，电泳显示全部为5s处弥散片段，求帮助
221/3返回列表123下一页
查看: 2324  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

s10010251

木虫 (小有名气)

[交流] RNA 提取后，电泳显示全部为5s处弥散片段，求帮助 已有10人参与

RNA 提取后，电泳显示全部为5s处弥散片段，在18s,28s处完全没有任何条带，非常干净。提取过程中注意事项基本做到。电泳时间20分钟，冰块制冷。不知道哪里出了问题，关键在于即使有降解，无论如何也不会降解成如此彻底。求高手帮助。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-14 22:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
嗯.......................
       如果很注意过程的话，这么彻底的降解没有见过，想问下你的初始样品会不会有问题，是收获样品过程中就有降解了，还是样品的种类比较麻烦都不好说（有些样品如动物某些器官是RNase富含的）。
赞一下(2人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2012-09-15 11:05:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

weishu杯子

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是跑胶的时间过长，不会影响反转录的。
我们跑RNA通常是增大电压，跑几分钟就可以了。
赞一下 回复此楼
快乐源于生活!!
2楼2012-09-15 10:51:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-19 15:01:19
RNA电泳
1，更换新鲜的缓冲液
2，高电压，快速跑
3，要是闲着无聊了，可以把电泳槽等用过氧化氢处理下，详见分子克隆
4，是不是你提的技术本身有问题，自己问过师兄师姐了么。。。
5，你用的试剂和管子都无RNASE了么。。。
这个问题多了，你一项项排除下
要不你下次跑的时候 带个人家做好的RNA，作为对照，就把你电泳体系的问题解决了
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-15 13:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yananhl

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-09-15 11:05:57
嗯.......................
       如果很注意过程的话，这么彻底的降解没有见过，想问下你的初始样品会不会有问题，是收获样品过程中就有降解了，还是样品的种类比较麻烦都不好说（有些样品如动物某些器官是RNase ...

动物某些器官是RNase富含的.请问哪些器官？
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-15 14:13:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by yananhl at 2012-09-15 14:13:29
动物某些器官是RNase富含的.请问哪些器官？...

嗯....................
       个人记忆中 胰脏最麻烦 RNase含量高同时不容易变性的
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
6楼2012-09-15 17:48:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s10010251

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by weishu杯子 at 2012-09-15 10:51:29
可能是跑胶的时间过长，不会影响反转录的。
我们跑RNA通常是增大电压，跑几分钟就可以了。

我在做RACE，需要纯化mRNA， 所有片段完整性很重要
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-16 19:58:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s10010251

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-09-15 11:05:57
嗯.......................
       如果很注意过程的话，这么彻底的降解没有见过，想问下你的初始样品会不会有问题，是收获样品过程中就有降解了，还是样品的种类比较麻烦都不好说（有些样品如动物某些器官是RNase ...

组织是蝗虫的触角，拔下来后直接放进液氮池，然后研磨加Trizol， 应该也没问题
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-16 19:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s10010251

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mamadexiao at 2012-09-15 13:43:11
RNA电泳
1，更换新鲜的缓冲液
2，高电压，快速跑
3，要是闲着无聊了，可以把电泳槽等用过氧化氢处理下，详见分子克隆
4，是不是你提的技术本身有问题，自己问过师兄师姐了么。。。
5，你用的试剂和管子都无RNA ...

最后一条好主意！上边几条基本都注意到了，电泳槽用氢氧化钠浸泡过，EB也是新鲜配制的
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-16 20:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junminh

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
把图放上，没有图只凭一句话，都是在猜。如果只有5S，降解肯定很严重，需要分析降解的原因。或者根本就没有提出RNA
赞一下 回复此楼
10楼2012-09-19 10:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 s10010251 的主题更新
221/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂0703 +7 啊我我的 2026-03-11 7/350 2026-03-15 23:03 by 凌千颂111
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +3 Liwangman 2026-03-15 3/150 2026-03-15 18:16 by JourneyLucky
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 化学工程321分求调剂（南京工业，浙江工业） +3 大米饭！ 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿浙江大学0856材料与化工求调剂 +4 yansheng@211 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工296分求调剂 +16 稻妻小编 2026-03-09 18/900 2026-03-14 02:00 by JourneyLucky
[考研] 328，0703考生求调剂，一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿郑大070303，338分，求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考研] 家人们 调剂不迷路 看这里 +8 likeihood 2026-03-09 13/650 2026-03-10 08:09 by likeihood
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭