24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

圣主魂

新虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 6.5
帖子: 29
在线: 8.4小时
虫号: 3456982
注册: 2014-10-06
专业: 生物化学

[求助] PCR扩出来的片段短怎么办？已有5人参与

PCR扩出来的片段比学哥以前做的2100bp短（大约短200bp），引物稍微把内切酶改动了下，体系用过学哥的也是没扩出来。94°：5min;94°：30s，60°：30s；72°：3min;72°：10min；34个循环。一直在做这个悲催的PCR,,,,,求解脱.........

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有199人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

10kb长片段pcr参数该设置什么已经有3人回复
如何确定自己的目的片段 PCR 痛苦中已经有17人回复
小片段PCR的问题已经有8人回复
3700bp大片段PCR的问题。。。急已经有20人回复
大片段PCR扩增求助已经有23人回复
PCR大片段问题已经有15人回复
求长片段（7.5 kb）PCR扩增方法？已经有17人回复
欲PCR扩增4200bp左右的目的片段，一直得不到目的条带，求高人指教！已经有25人回复
短片段PCR扩增已经有7人回复
5kb大片段PCR扩增求助已经有18人回复
无模板pcr合成短片段一直失败已经有44人回复
PCR产物继续扩增原来的片段效果会更好吗？已经有16人回复
大片段PCR(2.1K)扩增求助已经有12人回复
求助：PCR扩增片段测序结果引物中间多出150bp的片段已经有5人回复
PCR时出现了非目的片段的超大片段条带已经有16人回复
大片段PCR扩增求助已经有34人回复
PCR一直扩不出目的条带已经有10人回复
【求助/交流】菌落PCR扩出来的片段不是目的片段，咋办啊？？？？已经有9人回复
【求助/交流】为什么PCR扩增产物片段长度比设计时的要长很多？已经有10人回复
【求助/交流】PCR扩增核心片段，再也扩不出来了，怎么办已经有16人回复
【求助/交流】5500bp的片段PCR问题已经有21人回复

1楼2015-05-25 09:24:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

应助: 291 (大学生)
金币: 3118.2
散金: 46
红花: 19
帖子: 2030
在线: 579.3小时
虫号: 3046113
注册: 2014-03-13
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2015-05-26 11:23:53

PCR扩出来的片段比学哥以前做的2100bp短（大约短200bp）,这个片段基本上是对的，小200bp是正常的。

引物只换了内切酶的话，退火温度不用换，内切酶的碱基我基本是不计算进退火温度的，35个循环很好。延伸基本是一分钟1000bp，整体上你学哥的条件没问题。把你小200bp的片段送去测序看看，有条件的话，连个T载体，好测通。

赞一下

回复此楼

采菊东篱下，悠然见南山。

10楼2015-05-26 11:07:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主圣主魂的主题更新

返回列表