24小时热门版块排行榜    

查看: 1701  |  回复: 4

我是丫丫

木虫 (正式写手)

[交流] 纯化蛋白,蛋白分子量比较大,先过镍柱之后,之后做离子交换色谱还是超滤比较好

我第一次纯化分子量很大的蛋白,有HIS标签,所以打算先过镍柱,然后透析出盐,接下来是用超滤比较好还是离子交换色谱好还是其余的方法?没有做过离子交换色谱,求虫友建议,多谢,哪个成本比较低~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

一颗自由的心不知是被身体束缚还是梦想
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lomis

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-21 22:59:16
你看你这么多步骤,到最后估计也剩下不了什么了。
何不比较一下Ni柱和离子交换的效率,选一种,然后再优化一下不就好了?

按照方法的简易度来说肯定是超滤。
没有命运,只有选择!
2楼2015-05-21 11:33:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mataomatao

禁虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-21 22:59:32
本帖内容被屏蔽

3楼2015-05-21 20:50:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xscljl

银虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我是丫丫: 金币+1 2015-05-24 10:50:57
你该先看看经过Ni-柱纯化后的蛋白纯度和浓度(即透析除盐后跑个SDS-PAGE,考马斯亮蓝染一下色,看看有没有杂带)。如果杂带较多,且分子量与目的蛋白差别不是很大,超滤没效果;若杂带较少,目的蛋白浓度还行,跟着你的实验目的要求,确定是否有必要继续浓缩或纯化;有一点是离子交换前,上样蛋白浓度最好大一些,之后流出液蛋白浓度才能尽量符合你的要求。
      总之,需要跟着你的实验要求和蛋白本身的可溶性确定用什么方法纯化。
4楼2015-05-24 07:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

3q2002

银虫 (小有名气)


我是丫丫: 金币+1 2015-05-24 10:50:38
先离子交换,在Ni
5楼2015-05-24 09:04:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我是丫丫 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
请填处理意见