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glfcpu银虫 (小有名气)
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[交流]
关于用某种离子交换纯化蛋白时，如何测定该蛋白的动态载样量？ 已有4人参与
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关于这个问题自己查了很多资料，比较主流的说法是——“将待纯化的原始料液（不是纯蛋白），不停的进行上样，每管进行穿透收集，进行测定目标蛋白浓度，当穿透中的目标蛋白浓度为原始料液浓度的10%时就是10%穿透的载量。" 小虫在此提出两个问题，请各位同行探讨并指点： 1）关于这里的原始料液该如何理解，因为通常离子交换时需要调节上样液的pH和离子强度，使之接近于工作液（A相），所以这里的原始料液是否指调节过后的液体（通常是稀释液体）？ 2）上述提及的目标蛋白浓度为原始料液浓度的10%，这个该如何准确定量呢，是否可以简单理解为层析柱末端流出液的吸收值增值原始料液的紫外吸收值的10%？ |
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