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xuyun618

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1楼 2015-05-05 13:18:18

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feng37ye

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by 饿的神啊 at 2015-05-29 15:21:00
还可以直接跑引物对吗？具体怎么操作啊，就是3%的胶，然后上样什么的都和普通电泳一样吗，只是DNA换成引物对。上下游放一个孔，还是分开呢？求解释

...

不好意思。正常跑电泳久就可以，一个引物一个空，marker用小一点的，引物在50bp一下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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7楼2015-06-01 14:45:24

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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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【答案】应助回帖

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晞朔: MolEPI+1 2015-05-05 15:38:45

胶浓度也做梯度？170bp的条带，用2%的胶，胶浓度不要改变。
既然对温度梯度做了摸索，没有成功，说明问题不在温度，一般扩增不出阿狸主要还是看引物的设计是否合理，看图基本小于100bp可以判断是二聚体了，你还是从引物入手吧，或者使用特异性高的酶去扩增，低温下能够抑制非特异性产物产生，我们都是用热启动酶或者高保真酶都行，同时，注意模板的纯度，操作时候的

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