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求助打算帮我看看我的引物二聚体很亮,目的条带很暗怎么破
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虫号: 3603131
注册: 2014-12-19
专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
晞朔: MolEPI+1
2015-05-05 15:38:45
胶浓度也做梯度?170bp的条带,用2%的胶,胶浓度不要改变。
既然对温度梯度做了摸索,没有成功,说明问题不在温度,一般扩增不出阿狸主要还是看引物的设计是否合理,看图基本小于100bp可以判断是二聚体了,你还是从引物入手吧,或者使用特异性高的酶去扩增,低温下能够抑制非特异性产物产生,我们都是用
热启动酶
或者
高保真酶
都行,同时,注意模板的纯度,操作时候的
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todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼
2015-05-05 13:47:30
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