24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

毛毛虫989

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 128.5
帖子: 15
在线: 7.1小时
虫号: 1820052
注册: 2012-05-16
性别: MM
专业: 实验动物学

[求助] 镍柱纯化蛋白时，流出液及洗脱液如何处理已有2人参与

是这样的，我的目的蛋白是毕赤酵母表达的蛋白，蛋白主要在上清中，分子量在25kD左右，上清中蛋白的浓度为30mg/ml左右，我直接取12ml上清上柱，但是使用SDSPAGE检测时，不知如何处理每一个咪唑浓度收集的蛋白。
问题：1、要浓缩每一个咪唑浓度收集的蛋白吗？
2、还有什么好的办法来处理收集的洗脱液呢？
现急需，谢谢！

回复此楼

» 猜你喜欢

三无产品还有机会吗已经有4人回复
投稿返修后收到这样的回复，还有希望吗已经有7人回复
压汞仪和BET测气凝胶孔隙率已经有4人回复
博士申请都是内定的吗？已经有14人回复
谈谈两天一夜的“延安行” 已经有13人回复
氨基封端PDMS和HDI反应快速固化已经有11人回复
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？已经有11人回复
论文投稿求助已经有4人回复
Applied Surface Science 这个期刊。有哪位虫友投过的能把word模板发给我参考一下嘛已经有3人回复
投稿精细化工已经有6人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

镍柱有很多杂蛋白是缓冲液的问题还是什么问题？已经有11人回复
问咪唑洗脱完目标蛋白后，咪唑在柱上与镍结合，这个咪唑要不要除去已经有16人回复
包涵体上镍离子柱纯化后，洗脱收集的液体中目的蛋白不见了已经有10人回复
NI 柱纯化重组蛋白无法洗脱是什么原因？已经有9人回复
为何纯化带HIS标签的蛋白已经有5人回复
his标签蛋白怎么除咪唑、脱盐？已经有12人回复
重组蛋白在低浓度咪唑洗脱怎么办已经有4人回复
镍柱纯化His标签蛋白，洗脱不下来已经有11人回复
做蛋白质纯化该怎么脱盐已经有6人回复
求助，镍柱纯化蛋白，蛋白挂不上去已经有17人回复
His-tag蛋白纯化柱子洗脱液中除去咪唑的办法已经有8人回复
镍柱亲和层析纯化已经有6人回复
亲和镍柱那个公司的好？已经有6人回复
蛋白过镍柱纯化，在用咪唑洗脱后需要做透析，透析怎么做？？？已经有15人回复
纯化蛋白时关于溶液中咪唑的问题已经有7人回复
关于镍柱纯化，急求，！！已经有12人回复
镍柱纯化中再生后柱子变白，什么问题？已经有22人回复
蛋白质的Ni柱纯化问题已经有23人回复
蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来已经有14人回复
关于镍柱纯化蛋白已经有10人回复
关于变性条件下his-tag重组融合蛋白不结合镍柱以及部分结合镍柱情况已经有17人回复
镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀，请教已经有18人回复
【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？已经有9人回复

1楼2015-04-27 11:57:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

毛毛虫989

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 128.5
帖子: 15
在线: 7.1小时
虫号: 1820052
注册: 2012-05-16
性别: MM
专业: 实验动物学

引用回帖:

6楼: Originally posted by nemo88 at 2015-04-27 23:23:04
TCA是哪种呢？沉淀富集蛋白吗？太酸肯定不适合过镍柱了，如果是富集的话，过镍柱不用富集处理的，直接过就行
处理的话，直接取样，加loading buffer煮就可以，你是怕检测不到吗？不行就做银染，有条件做western， ...

谢谢你的回答，我想再问一下你，我洗脱10个柱体积，收集的前三管，每一管是1ml的话，如何处理，我的实验室有2×的loading buffer，能说一下具体的细节吗？

[ 发自小木虫客户端 ]