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just_bloom

木虫 (正式写手)

[交流] PCR 非特异性扩增

功能基因筛选  PCR  老是有非特异性扩增,而且两种功能基因的引物出来各自目的带的同时还有一条扩增带,目的带基本是600bp-700bp,
体系   20ul,到底是什么原因?
求解释

PCR 非特异性扩增
pks 15.4.16(2) CH..jpg


PCR 非特异性扩增-1
pks 15.4.16(3) CH..jpg


PCR 非特异性扩增-2
卤化酶4.15(4)..jpg
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xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)


just_bloom: 金币+1, 谢谢 2015-04-27 09:55:15
祝你一切顺利,努力加油,心想事成,好梦成真!
2楼2015-04-17 10:21:15
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
just_bloom: 金币+2, 谢谢 2015-04-27 09:53:47
看图,虽然有非特异性扩增,但是很微弱,不严重,属正常吧,如果要求很高的话,可以使用特异性强的酶,可以改善
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-04-17 11:20:13
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亲叫我石头

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
just_bloom: 金币+2, 谢谢 2015-04-27 09:54:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-17 11:20:13
看图,虽然有非特异性扩增,但是很微弱,不严重,属正常吧,如果要求很高的话,可以使用特异性强的酶,可以改善

试试酶和退火温度…

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-04-18 03:11:06
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
just_bloom: 金币+1, 谢谢 2015-04-27 09:54:59
路过的看了一下,帮顶,祝福好运!~~~~~~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
5楼2015-04-18 06:57:39
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6楼2015-04-18 07:46:31
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7楼2015-04-18 07:54:39
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五维度的爱

金虫 (小有名气)

★ ★
just_bloom: 金币+2, 谢谢 2015-04-27 09:54:27
看一下你扩增基因有没有变体
8楼2015-04-20 14:38:25
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just_bloom

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-17 11:20:13
看图,虽然有非特异性扩增,但是很微弱,不严重,属正常吧,如果要求很高的话,可以使用特异性强的酶,可以改善

最亮的是非特异,微弱的是目的带
9楼2015-04-27 09:37:06
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just_bloom

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 五维度的爱 at 2015-04-20 14:38:25
看一下你扩增基因有没有变体

怎么看
10楼2015-04-27 09:54:36
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