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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR 非特异性扩增
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just_bloom

木虫 (正式写手)

[交流] PCR 非特异性扩增

功能基因筛选  PCR  老是有非特异性扩增，而且两种功能基因的引物出来各自目的带的同时还有一条扩增带，目的带基本是600bp-700bp，
体系   20ul，到底是什么原因？
求解释

PCR 非特异性扩增
pks 15.4.16(2) CH..jpg


PCR 非特异性扩增-1
pks 15.4.16(3) CH..jpg


PCR 非特异性扩增-2
卤化酶4.15（4）..jpg
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1楼 2015-04-17 10:14:40
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xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)
★
just_bloom: 金币+1, 谢谢 2015-04-27 09:55:15
祝你一切顺利，努力加油，心想事成，好梦成真！
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2楼2015-04-17 10:21:15
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
just_bloom: 金币+2, 谢谢 2015-04-27 09:53:47
看图，虽然有非特异性扩增，但是很微弱，不严重，属正常吧，如果要求很高的话，可以使用特异性强的酶，可以改善
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-04-17 11:20:13
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亲叫我石头

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
just_bloom: 金币+2, 谢谢 2015-04-27 09:54:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-17 11:20:13
看图，虽然有非特异性扩增，但是很微弱，不严重，属正常吧，如果要求很高的话，可以使用特异性强的酶，可以改善

试试酶和退火温度…

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2015-04-18 03:11:06
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
just_bloom: 金币+1, 谢谢 2015-04-27 09:54:59
路过的看了一下，帮顶，祝福好运！~~~~~~~~~~~~~~~~~~
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自强不息，厚德载物；独立精神，自由思想。
5楼2015-04-18 06:57:39
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8wangle
6楼2015-04-18 07:46:31
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jerry180
7楼2015-04-18 07:54:39
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五维度的爱

金虫 (小有名气)
★ ★
just_bloom: 金币+2, 谢谢 2015-04-27 09:54:27
看一下你扩增基因有没有变体
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8楼2015-04-20 14:38:25
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just_bloom

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-17 11:20:13
看图，虽然有非特异性扩增，但是很微弱，不严重，属正常吧，如果要求很高的话，可以使用特异性强的酶，可以改善

最亮的是非特异，微弱的是目的带
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9楼2015-04-27 09:37:06
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just_bloom

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 五维度的爱 at 2015-04-20 14:38:25
看一下你扩增基因有没有变体

怎么看
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10楼2015-04-27 09:54:36
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