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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 如何验证realtime的引物是否可以使用？
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liuwukang

新虫 (小有名气)

[交流] 如何验证realtime的引物是否可以使用？ 已有4人参与

设计了几组引物，不知道怎么验证有没有效，直接跑realtime太麻烦成本也太高，可以先用普通的pcr扩增试试吗？
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1楼 2015-04-15 14:35:50
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liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2015-04-16 08:09:34
可以，先用普通PCR看看条带是否单一。

空白对照也会出现极少量的荧光信号是因为二聚体的原因嘛？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2015-04-16 14:46:10
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
★
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可以，先用普通PCR看看条带是否单一。
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2楼2015-04-16 08:09:34
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星空物语星空

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
其实还是建议跑一下realtime更放心，你可以用一个用ACTIN的引物验证过的模板，用这个模板来验证你的引物，如果QPCR曲线和溶解曲线都正常的话，就可以用。
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4楼2015-04-19 11:31:01
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694839002

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
同上，还是qpcry按照靠谱，
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PTMproteomicsisthefutureoflifescicence http://www.ptm-biolab.com.cn/
5楼2015-04-19 14:10:41
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