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关于甲醛滴定测蛋白酶水解大豆蛋白的水解度问题!!急急急!!!
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将7.5g大豆分离蛋白粉加入到250ml, pH7.2的磷酸缓冲液后加热溶解,室温搅拌10min后,进行沸水浴15min。沸水浴后,等待至冷却到60℃后,将大豆分离蛋白液分装至30支离心管中,以4000r,5min进行离心,最后取上清液进行分装,45℃保存。 取5ml在最优条件下获得的酶解样品。加入60ml蒸馏水,用0.1mol/L NaOH溶液调节pH至8.20,加入20ml已中和(pH8.20)的甲醛溶液,然后用0.1mol/L的NaOH溶液滴定至pH9.20并记录消耗的NaOH体积V1,然后用蒸馏水(缓冲液)代替酶解样品后进行下列操作,记录下空白体积V0。 游离氨基的浓度(mmol/L)=1000× 0.1× (V1- V0)/5.0 样品水解度为: DH(%)= 100(1000× 0.l× (V1- V0)/5.00/C - 0.33)/7.8 式中:C——样品中原大豆蛋白浓度,g/L 0.33——大豆蛋白中游离氨基浓度,mmol/g 7.8——为每克大豆蛋白的肽键当量数,mmol/g 我们测定的V1为1.67ml v2为1.30ml,C按操作是为30g/L? 根据公式算出来是为负数!是什么问题?哪里算错了么? |
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