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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 胰蛋白酶水解蛋白水解度很低
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taipin345

铜虫 (小有名气)

[求助] 胰蛋白酶水解蛋白水解度很低已有5人参与

小弟最近在做微波辅助胰蛋白酶水解蛋白的实验，发现水解度很低，一直上不去，试过提高温度和pH的方法。可是水解度依然很低，而且随着pH的增加水解度竟然也提高了，到了pH10的水解度竟然比8的还要高很多，这是怎么回事呢？不是文献上说胰蛋白酶的最适pH在8左右吗？
我才用的是pH-Stat方法测定水解度，如果我想做一个分步水解的酶解，用什么方法测定水解度比较好呢？
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1楼2013-12-27 08:38:51
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

softcheese

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by taipin345 at 2013-12-27 16:33:03
嗯，我也试过，发现还是很低，我把底物浓度，E/S比，pH，温度都试过了，还是很低。...

你用什么方法测定的水解度？
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6楼2013-12-30 12:38:40
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普通回帖

xiaoyukong

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换几种测定水解度的方法吧，发现几种水解度的方法显示的结果不一致。还有是否一定选择胰蛋白酶作用？
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2楼2013-12-27 08:46:09
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taipin345

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoyukong at 2013-12-27 08:46:09
换几种测定水解度的方法吧，发现几种水解度的方法显示的结果不一致。还有是否一定选择胰蛋白酶作用？

嗯，方法的话选什么比较容易测定呢？甲醛滴定？茚三酮显色？

嗯  不一定非要选择胰蛋白酶。别的蛋白酶也在做，就是这个一直效果不好
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3楼2013-12-27 12:55:30
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zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你不用微博只用胰蛋白酶在最适pH试试看，是不是微博功率过高抑制酶活
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走的太远，别忘了为何出发
4楼2013-12-27 15:04:37
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taipin345

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zybpxy at 2013-12-27 15:04:37
你不用微博只用胰蛋白酶在最适pH试试看，是不是微博功率过高抑制酶活

嗯，我也试过，发现还是很低，我把底物浓度，E/S比，pH，温度都试过了，还是很低。
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5楼2013-12-27 16:33:03
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taipin345

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by softcheese at 2013-12-30 12:38:40
你用什么方法测定的水解度？...

pH-stat
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7楼2013-12-31 10:20:12
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赖穗0911

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by taipin345 at 2013-12-31 10:20:12
pH-stat...

我也做过phstat 发现，消耗的碱好少，没法精确了

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求解答
8楼2015-04-11 09:25:52
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双双麦香

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

水解过程中，应该保持ph在8，过程中ph会变得，应该加碱保持

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Happy,isthemostimpotantthing!
9楼2015-04-13 22:15:09
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吴晓江

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 赖穗0911 at 2015-04-11 09:25:52
我也做过phstat 发现，消耗的碱好少，没法精确了
...

你好，请问加的碱很少吗？你用的是多少摩尔浓度的碱？
谢谢～

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学无止境，好知者不如乐知者
10楼2016-09-12 22:56:38
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