24小时热门版块排行榜    

查看: 3054  |  回复: 12

taipin345

铜虫 (小有名气)

[求助] 胰蛋白酶水解蛋白水解度很低 已有5人参与

小弟最近在做微波辅助胰蛋白酶水解蛋白的实验,发现水解度很低,一直上不去,试过提高温度和pH的方法。可是水解度依然很低,而且随着pH的增加水解度竟然也提高了,到了pH10的水解度竟然比8的还要高很多,这是怎么回事呢?不是文献上说胰蛋白酶的最适pH在8左右吗?
我才用的是pH-Stat方法测定水解度,如果我想做一个分步水解的酶解,用什么方法测定水解度比较好呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

softcheese

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by taipin345 at 2013-12-27 16:33:03
嗯,我也试过,发现还是很低,我把底物浓度,E/S比,pH,温度都试过了,还是很低。...

你用什么方法测定的水解度?
6楼2013-12-30 12:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

xiaoyukong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换几种测定水解度的方法吧,发现几种水解度的方法显示的结果不一致。还有是否一定选择胰蛋白酶作用?
2楼2013-12-27 08:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taipin345

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoyukong at 2013-12-27 08:46:09
换几种测定水解度的方法吧,发现几种水解度的方法显示的结果不一致。还有是否一定选择胰蛋白酶作用?

嗯,方法的话选什么比较容易测定呢?甲醛滴定?茚三酮显色?

嗯  不一定非要选择胰蛋白酶。别的蛋白酶也在做,就是这个一直效果不好
3楼2013-12-27 12:55:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你不用微博只用胰蛋白酶在最适pH试试看,是不是微博功率过高抑制酶活
走的太远,别忘了为何出发
4楼2013-12-27 15:04:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taipin345

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zybpxy at 2013-12-27 15:04:37
你不用微博只用胰蛋白酶在最适pH试试看,是不是微博功率过高抑制酶活

嗯,我也试过,发现还是很低,我把底物浓度,E/S比,pH,温度都试过了,还是很低。
5楼2013-12-27 16:33:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taipin345

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by softcheese at 2013-12-30 12:38:40
你用什么方法测定的水解度?...

pH-stat
7楼2013-12-31 10:20:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赖穗0911

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by taipin345 at 2013-12-31 10:20:12
pH-stat...

我也做过phstat 发现,消耗的碱好少,没法精确了

[ 发自小木虫客户端 ]
求解答
8楼2015-04-11 09:25:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

双双麦香

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

水解过程中,应该保持ph在8,过程中ph会变得,应该加碱保持

[ 发自小木虫客户端 ]
Happy,isthemostimpotantthing!
9楼2015-04-13 22:15:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

吴晓江

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 赖穗0911 at 2015-04-11 09:25:52
我也做过phstat 发现,消耗的碱好少,没法精确了
...

你好,请问加的碱很少吗?你用的是多少摩尔浓度的碱?
谢谢~

发自小木虫Android客户端
学无止境,好知者不如乐知者
10楼2016-09-12 22:56:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 taipin345 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:31 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +11 羊腰板 2026-08-21 11/550 2026-08-22 22:03 by lsbin3733
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +3 简单化xn 2026-08-22 7/350 2026-08-22 19:46 by 简单化xn
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见