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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 花生或大豆水解过的蛋白质怎么样提取并纯化，要提率尽量高，纯度也尽量高?
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)

[求助] 花生或大豆水解过的蛋白质怎么样提取并纯化，要提率尽量高，纯度也尽量高?

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1楼 2012-07-23 09:39:23
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxj at 2012-07-24 11:48:11
要过柱子的，有许多资料你查阅看看

我的没有目标蛋白，是尽量把所以的的蛋白和小肽都提取出来，还要纯度尽量高，我是新手，请高人指点呀！万分感谢
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4楼2012-07-24 14:22:12
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要过柱子的，有许多资料你查阅看看
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jiaoguan
2楼2012-07-24 11:48:11
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要纯度高可以联合两个柱子一起用，如大孔树脂AB-8和离子交换柱子或凝胶柱子一起用。  要想提前率高 的话就多优化优化提取方法吧，可以从文献中找方法，祝你好运
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jiaoguan
海纳百川，有容乃大
3楼2012-07-24 13:05:26
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 13:05:26
要纯度高可以联合两个柱子一起用，如大孔树脂AB-8和离子交换柱子或凝胶柱子一起用。  要想提前率高 的话就多优化优化提取方法吧，可以从文献中找方法，祝你好运

非常感谢，我没有目标蛋白，想尽量把所以的蛋白和小肽都提取出来，纯度还要高，用什么方法比较合适呢，我是新手，对蛋白纯化不够了解，请多指教！！
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5楼2012-07-24 14:25:54
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jiaoguan: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2012-07-24 17:50:14
先用有机溶剂提取，可以配制不同浓度的有机溶液，做一个响应面分析，不同时间，不同温度以及不同的浓度对提取率的影响，优化出最佳的提取条件，然后过AB-8大孔树脂，出去多糖和其他杂质，再用聚丙烯酰胺凝胶柱子分离纯化。
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jiaoguan
海纳百川，有容乃大
6楼2012-07-24 14:37:38
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 14:37:38
先用有机溶剂提取，可以配制不同浓度的有机溶液，做一个响应面分析，不同时间，不同温度以及不同的浓度对提取率的影响，优化出最佳的提取条件，然后过AB-8大孔树脂，出去多糖和其他杂质，再用聚丙烯酰胺凝胶柱子分离 ...

有机溶剂法容易使蛋白质变性，我能不能用在等电点用硫酸铵沉淀法提取粗蛋白，然后再过柱子？
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7楼2012-07-24 15:13:57
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xyz7819227

木虫 (正式写手)
刚刚在忙着帮老板写基金，可累死我了，你这个方法也可以试试，毕竟多操作，多试验才能有提高
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海纳百川，有容乃大
8楼2012-07-24 17:53:58
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 17:53:58
刚刚在忙着帮老板写基金，可累死我了，你这个方法也可以试试，毕竟多操作，多试验才能有提高

太感谢了，我先做做试试，不会了，再向高手请教！
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9楼2012-07-24 18:31:54
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jiaoguan at 2012-07-24 14:22:12
我的没有目标蛋白，是尽量把所以的的蛋白和小肽都提取出来，还要纯度尽量高，我是新手，请高人指点呀！万分感谢...

就是要分离纯化区分开，然后检测，全部拿出来是什么意思，你肯定是只要其中的活性部分吧，估计全部拿出来的结果很难重复出来，再说有何用，那么多的肽
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10楼2012-07-30 01:50:46
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