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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)

[求助] 花生或大豆水解过的蛋白质怎么样提取并纯化,要提率尽量高,纯度也尽量高?

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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
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2楼: Originally posted by zhouxj at 2012-07-24 11:48:11
要过柱子的,有许多资料你查阅看看

我的没有目标蛋白,是尽量把所以的的蛋白和小肽都提取出来,还要纯度尽量高,我是新手,请高人指点呀!万分感谢
4楼2012-07-24 14:22:12
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要过柱子的,有许多资料你查阅看看

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2楼2012-07-24 11:48:11
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要纯度高可以联合两个柱子一起用,如大孔树脂AB-8和离子交换柱子或凝胶柱子一起用。  要想提前率高 的话就多优化优化提取方法吧,可以从文献中找方法,祝你好运

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海纳百川,有容乃大
3楼2012-07-24 13:05:26
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
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3楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 13:05:26
要纯度高可以联合两个柱子一起用,如大孔树脂AB-8和离子交换柱子或凝胶柱子一起用。  要想提前率高 的话就多优化优化提取方法吧,可以从文献中找方法,祝你好运

非常感谢,我没有目标蛋白,想尽量把所以的蛋白和小肽都提取出来,纯度还要高,用什么方法比较合适呢,我是新手,对蛋白纯化不够了解,请多指教!!
5楼2012-07-24 14:25:54
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jiaoguan: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2012-07-24 17:50:14
先用有机溶剂提取,可以配制不同浓度的有机溶液,做一个响应面分析,不同时间,不同温度以及不同的浓度对提取率的影响,优化出最佳的提取条件,然后过AB-8大孔树脂,出去多糖和其他杂质,再用聚丙烯酰胺凝胶柱子分离纯化。

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海纳百川,有容乃大
6楼2012-07-24 14:37:38
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 14:37:38
先用有机溶剂提取,可以配制不同浓度的有机溶液,做一个响应面分析,不同时间,不同温度以及不同的浓度对提取率的影响,优化出最佳的提取条件,然后过AB-8大孔树脂,出去多糖和其他杂质,再用聚丙烯酰胺凝胶柱子分离 ...

有机溶剂法容易使蛋白质变性,我能不能用在等电点用硫酸铵沉淀法提取粗蛋白,然后再过柱子?
7楼2012-07-24 15:13:57
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xyz7819227

木虫 (正式写手)

刚刚在忙着帮老板写基金,可累死我了,你这个方法也可以试试,毕竟多操作,多试验才能有提高
海纳百川,有容乃大
8楼2012-07-24 17:53:58
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-24 17:53:58
刚刚在忙着帮老板写基金,可累死我了,你这个方法也可以试试,毕竟多操作,多试验才能有提高

太感谢了,我先做做试试,不会了,再向高手请教!
9楼2012-07-24 18:31:54
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jiaoguan at 2012-07-24 14:22:12
我的没有目标蛋白,是尽量把所以的的蛋白和小肽都提取出来,还要纯度尽量高,我是新手,请高人指点呀!万分感谢...

就是要分离纯化区分开,然后检测,全部拿出来是什么意思,你肯定是只要其中的活性部分吧,估计全部拿出来的结果很难重复出来,再说有何用,那么多的肽
10楼2012-07-30 01:50:46
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