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gaojing_0312

木虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】蛋白质水解

我最近要做一个多肽的水解,然后测定氨基酸。查看文献发现水解条件是6mol/L盐酸110℃水解24h,可是这个条件怎么达到呢,可不可以放在烘箱里或高压灭菌锅中,具体怎么操作呢。有文献说水解需要在氮气环境中,那么什么时候需要氮气环境什么时候又不需要氮气环境呢,望大家多提意见。
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我是自然界最伟大的奇迹
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xzw1215225

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-16 07:39:25
gaojing_0312(金币+3): 2011-11-20 21:31:35
烘箱里110度就可以啦 在高温烘烤是要氮气保护 你水解的很少的话就放在一个西林瓶扎盖充氮气就可以啦   弱弱的问下肽名
2楼2011-11-15 21:51:20
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songyupin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-18 09:00:14
我以前也做过多肽的水解反应,也是按你上面提到的条件。我是在油浴锅中将温度调到110℃反应的。但我个人认为水溶液能达到的最高温度不是只有100℃吗,即使外界温度是110℃,反应温度也达不到吧,除非改变压力。不过我当时不需要完全水解,只反应了三四个小时就水解掉了。
3楼2011-11-18 08:52:41
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ahlajs

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

110度24小时温度控制可以直接把密封好的具赛瓶子放入烘箱中就可以了;
氮气密封主要是为了防止部分氨基酸易被空气氧化,而将空气与水解液隔开的,如光胱氨酸的,有的文献中报道先把水解液冷冻,然后吹氮密封,再解溶放入烘箱中。
4楼2011-11-19 22:57:32
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gaojing_0312

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ahlajs at 2011-11-19 22:57:32:
110度24小时温度控制可以直接把密封好的具赛瓶子放入烘箱中就可以了;
氮气密封主要是为了防止部分氨基酸易被空气氧化,而将空气与水解液隔开的,如光胱氨酸的,有的文献中报道先把水解液冷冻,然后吹氮密封,再 ...

可是烘箱的温度能保持恒定吗,文献上是这么写的,我也不知道具体水解液需不需要达到110℃。在烘箱里我测了一下,溶液的温度大概是90多度。
我是自然界最伟大的奇迹
5楼2011-11-23 20:55:17
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gaojing_0312

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by songyupin at 2011-11-18 08:52:41:
我以前也做过多肽的水解反应,也是按你上面提到的条件。我是在油浴锅中将温度调到110℃反应的。但我个人认为水溶液能达到的最高温度不是只有100℃吗,即使外界温度是110℃,反应温度也达不到吧,除非改变压力。不 ...

我也用了高压灭菌锅,可是维持不了24h那么长时间啊。并且高压灭菌锅的在126°才会自动放气,维持一个小时之后锅内的水分就要降到加热管平面了,如果继续加热就会烧干。
我是自然界最伟大的奇迹
6楼2011-11-23 20:57:28
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溪望

新虫 (初入文坛)

我用的是冷凝回流装置,下面用电炉加热的,但是怕不安全,晚上走的时候都是关掉的,不知道有没有影响,现在还没水解完,但是我的水解液变成深红色了,不知道为什么
7楼2012-04-22 21:40:24
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苏信

新虫 (初入文坛)

怎么确定盐酸用多少呢
8楼2015-10-21 17:25:06
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