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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】蛋白质水解
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gaojing_0312

木虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】蛋白质水解

我最近要做一个多肽的水解，然后测定氨基酸。查看文献发现水解条件是6mol/L盐酸110℃水解24h，可是这个条件怎么达到呢，可不可以放在烘箱里或高压灭菌锅中，具体怎么操作呢。有文献说水解需要在氮气环境中，那么什么时候需要氮气环境什么时候又不需要氮气环境呢，望大家多提意见。
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我是自然界最伟大的奇迹
1楼 2011-11-15 17:09:11
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xzw1215225

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-16 07:39:25
gaojing_0312(金币+3): 2011-11-20 21:31:35
烘箱里110度就可以啦 在高温烘烤是要氮气保护 你水解的很少的话就放在一个西林瓶扎盖充氮气就可以啦   弱弱的问下肽名
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2楼2011-11-15 21:51:20
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songyupin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-18 09:00:14
我以前也做过多肽的水解反应，也是按你上面提到的条件。我是在油浴锅中将温度调到110℃反应的。但我个人认为水溶液能达到的最高温度不是只有100℃吗，即使外界温度是110℃，反应温度也达不到吧，除非改变压力。不过我当时不需要完全水解，只反应了三四个小时就水解掉了。
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3楼2011-11-18 08:52:41
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ahlajs

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

110度24小时温度控制可以直接把密封好的具赛瓶子放入烘箱中就可以了；
氮气密封主要是为了防止部分氨基酸易被空气氧化，而将空气与水解液隔开的，如光胱氨酸的，有的文献中报道先把水解液冷冻，然后吹氮密封，再解溶放入烘箱中。
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4楼2011-11-19 22:57:32
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gaojing_0312

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ahlajs at 2011-11-19 22:57:32:
110度24小时温度控制可以直接把密封好的具赛瓶子放入烘箱中就可以了；
氮气密封主要是为了防止部分氨基酸易被空气氧化，而将空气与水解液隔开的，如光胱氨酸的，有的文献中报道先把水解液冷冻，然后吹氮密封，再 ...

可是烘箱的温度能保持恒定吗，文献上是这么写的，我也不知道具体水解液需不需要达到110℃。在烘箱里我测了一下，溶液的温度大概是90多度。
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我是自然界最伟大的奇迹
5楼2011-11-23 20:55:17
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gaojing_0312

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by songyupin at 2011-11-18 08:52:41:
我以前也做过多肽的水解反应，也是按你上面提到的条件。我是在油浴锅中将温度调到110℃反应的。但我个人认为水溶液能达到的最高温度不是只有100℃吗，即使外界温度是110℃，反应温度也达不到吧，除非改变压力。不 ...

我也用了高压灭菌锅，可是维持不了24h那么长时间啊。并且高压灭菌锅的在126°才会自动放气，维持一个小时之后锅内的水分就要降到加热管平面了，如果继续加热就会烧干。
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我是自然界最伟大的奇迹
6楼2011-11-23 20:57:28
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溪望

新虫 (初入文坛)
我用的是冷凝回流装置，下面用电炉加热的，但是怕不安全，晚上走的时候都是关掉的，不知道有没有影响，现在还没水解完，但是我的水解液变成深红色了，不知道为什么
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7楼2012-04-22 21:40:24
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苏信

新虫 (初入文坛)
怎么确定盐酸用多少呢
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8楼2015-10-21 17:25:06
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