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关于甲醛滴定测蛋白酶水解大豆蛋白的水解度问题！！急急急！！！
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将7.5g大豆分离蛋白粉加入到250ml， pH7.2的磷酸缓冲液后加热溶解，室温搅拌10min后，进行沸水浴15min。沸水浴后，等待至冷却到60℃后，将大豆分离蛋白液分装至30支离心管中，以4000r,5min进行离心，最后取上清液进行分装，45℃保存。 取5ml在最优条件下获得的酶解样品。加入60ml蒸馏水，用0.1mol/L NaOH溶液调节pH至8.20，加入20ml已中和（pH8.20）的甲醛溶液，然后用0.1mol/L的NaOH溶液滴定至pH9.20并记录消耗的NaOH体积V1，然后用蒸馏水（缓冲液）代替酶解样品后进行下列操作，记录下空白体积V0。 游离氨基的浓度（mmol/L）=1000× 0.1× (V1－ V0)/5.0 样品水解度为: DH(%)＝ 100(1000× 0.l× (V1－ V0)/5.00/C - 0.33)/7.8 式中：C——样品中原大豆蛋白浓度，g/L 0.33——大豆蛋白中游离氨基浓度，mmol/g 7.8——为每克大豆蛋白的肽键当量数，mmol/g 我们测定的V1为1.67ml v2为1.30ml，C按操作是为30g/L? 根据公式算出来是为负数！是什么问题？哪里算错了么？ |
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