| 查看: 3533 | 回复: 1 | ||
[求助]
real time PCR引物如何验证？ 已有1人参与
|
| 本人在做real time PCR，之前的引物有150bp,130bp的，用常规的PCR很好验证，并且进行了realtime的实验，最近在做另外几个基因的引物验证，长度80几bp,PCR效果不好，好多杂带，目的片段看不到，请大神们帮帮忙分析分析，引物序列肯定是没问题的，想问问大家都是怎么验证引物的合理性的？实验室也没人做过这方面的，真是苦死了···跪求解答 |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有174人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 错用了real-time的引物 我这些条带会是引物二聚体吗
已经有10人回复
- 判断引物是否适合用于qRT-PCR
已经有4人回复
- 基因组PCR用于验证RT-PCR引物的实验思路，请大虾们把把关
已经有21人回复
- 引物设计跨内含子
已经有6人回复
- 求助检测基因沉默的qPCR引物设计问题
已经有7人回复
- 荧光定量，怎么验证引物效率呢
已经有6人回复
- 请问从文献中查到了引物序列，但不知道PCR反应条件，应该用什么软件
已经有4人回复
- 设计了简并引物，PCR扩不出条带
已经有9人回复
- 求助荧光定量引物验证？
已经有3人回复
- 关于qRT-PCR内参基因的验证
已经有10人回复
- ChIP结果的Realtime检测
已经有8人回复
- QPCR之引物设计(二)
已经有10人回复
- 荧光定量引物设计
已经有4人回复
- Realtime PCR 内参与目的基因问题
已经有11人回复
- 通过RT-PCR 获得了一段保守序列 接着如何设计RACE引物
已经有21人回复
- 荧光PCR引物和探针稀释问题
已经有11人回复
- 荧光定量PCR的模板浓度
已经有12人回复
- PCR引物的量如何确定，求助高手指教
已经有11人回复
- realtimePCR引物
已经有11人回复
- 【求助/交流】Real time PCR 熔点曲线求助，谢谢
已经有12人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
玻璃花1: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-04-12 22:00:13
感谢参与，应助指数 +1
玻璃花1: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-04-12 22:00:13
|
用引物做real time PCR上机实验， 1、设置溶解曲线步骤，如果结果显示溶解曲线是单峰而且退火温度跟预测值相符，说明引物特异；如果溶解曲线多峰，引物有非特异性扩增，弃之不用。 2、将模板DNA设置稀释梯度，计算引物的扩增效率。 我一般是目的基因多设计几对引物，通过实验，选择好的用。 |
2楼2015-04-11 18:31:34
