应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白电泳跑成这样是怎么回事啊？
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 1601  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白电泳跑成这样是怎么回事啊？ 已有4人参与

我对转化后的大肠杆菌诱导了一下，然后检测目的蛋白是否表达，但是跑出来的胶是这个样子的，根本看不出来条带，怎么回事啊？向各路大神求教。是制备样品的方法不对吗？我是取1ml菌液，12000rpm离心1min，将菌体用50ul的10%SDS重新悬浮，再加50ul的上样缓冲液，100℃加热10min，离心，上样。还是我做的胶有问题啊？我下一步应该怎么做呢？

蛋白电泳跑成这样是怎么回事啊？
ERD[K}W0PJ@W}%L413`)M94.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-04-05 10:16:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶晓波1572

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
温室里的杂草: 金币+1, ★有帮助 2015-04-08 17:22:04
marker 与样品上样量均太多，都溢到相邻的泳道上去了。应该都减少上样量。另外，检测诱导蛋白的表达，应该加一个阴性对照（空载体转表达宿主菌的诱导样品）。
赞一下 回复此楼
8楼2015-04-08 14:16:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

胡程

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+3, ★有帮助 2015-04-06 09:34:11
我怀疑是菌体太浓，我做样的时候是用1.2毫升菌体，40微升5x上样缓冲液+160微升PBS稀释的，上样量是25微升。你可以试着稀释一下或者上样量减少，10微升足够了吧
赞一下 回复此楼
做最好的自己
2楼2015-04-05 11:07:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 胡程 at 2015-04-05 11:07:26
我怀疑是菌体太浓，我做样的时候是用1.2毫升菌体，40微升5x上样缓冲液+160微升PBS稀释的，上样量是25微升。你可以试着稀释一下或者上样量减少，10微升足够了吧

好的，谢谢，我做一下试试看
赞一下 回复此楼
3楼2015-04-06 09:34:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 胡程 at 2015-04-05 11:07:26
我怀疑是菌体太浓，我做样的时候是用1.2毫升菌体，40微升5x上样缓冲液+160微升PBS稀释的，上样量是25微升。你可以试着稀释一下或者上样量减少，10微升足够了吧

我还想问一下你处理菌液的方法是加热吗？加热以后是直接上样还是离心取上清啊？
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-06 09:39:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 生物学308求调剂 +6 相信必会光芒万� 2026-04-11 6/300 2026-04-14 08:57 by licg0208
[考研] 085404 298分求调剂 +11 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 12/600 2026-04-14 08:38 by wfj257
[考研] 材料复试求调剂 +24 xhhdjdjsjks 2026-04-09 24/1200 2026-04-13 15:49 by 幸免 ..
[考研] 一志愿厦大生物学332求调剂 +11 池池池池池池 2026-04-08 11/550 2026-04-13 14:10 by 科研论
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +7 Ytyt11 2026-04-09 8/400 2026-04-12 16:57 by ajpv风雷
[考研] 296求调剂 +14 汪！？！ 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 307求调剂 +10 tzq94092 2026-04-10 10/500 2026-04-12 08:18 by wise999
[考研] 280求调剂 +13 wzzz王 2026-04-09 13/650 2026-04-12 00:31 by 勇攀高峰0126
[考研] 求调剂 +18 MAX怅惘 2026-04-09 20/1000 2026-04-11 23:31 by zhen～
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 302分求调剂 +9 凡语祈愿 2026-04-08 10/500 2026-04-10 23:26 by 314126402
[考研] 285求调剂 +9 AZMK 2026-04-07 11/550 2026-04-10 15:24 by AZMK
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 一志愿华东师范生物学326分，求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭