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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » gst 融合蛋白切掉GST tag后目的蛋白沉淀怎么办？
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kekexiliwolf

金虫 (正式写手)

小屁虫

[求助] gst 融合蛋白切掉GST tag后目的蛋白沉淀怎么办？

请教各位前辈，我最近在试图表达一个蛋白，溶解性不好，所以借助gst tag一是想增加溶解性，二是便于纯化，加上gst之后确实很成功，表达的很好，但是将GST切掉之后（TEV位点，用TEV酶切的）第二天早上发现大量沉淀，检测发现沉淀有未切完全的融合蛋白，有切割之后的目的蛋白，还有GST也有沉淀，本来觉得gst溶解性很好。不应该沉淀，不知道为什么，本人是个菜鸟，请各位前辈多多指教，教教我能否有啥好办法解决这个问题。
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我们在为了文章而搞科研
1楼 2015-03-28 01:56:24
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