金虫 (正式写手)
小屁虫 ![]()
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[求助]
gst 融合蛋白切掉GST tag后目的蛋白沉淀怎么办?
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请教各位前辈,我最近在试图表达一个蛋白,溶解性不好,所以借助gst tag一是想增加溶解性,二是便于纯化,加上gst之后确实很成功,表达的很好,但是将GST切掉之后(TEV位点,用TEV酶切的)第二天早上发现大量沉淀,检测发现沉淀有未切完全的融合蛋白,有切割之后的目的蛋白,还有GST也有沉淀,本来觉得gst溶解性很好。不应该沉淀,不知道为什么,本人是个菜鸟,请各位前辈多多指教,教教我能否有啥好办法解决这个问题。 |
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