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PGEX-4T-1载体表达产物，GST标签的切除
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最近做一个蛋白连接到GEX-4T-1上进行表达，但发现该蛋白检测人血清中的抗体的时候，有很高的假阳出现。现在考虑可能是GST标签的原因，因此想切除此标签。我们论坛上的虫友不知道有没有做过相关的，麻烦指导一下 1. 选用凝血酶进行切除， 看有人用人凝血酶（sigmaT6884 ），不知道效率如何 2.用GST纯化以后再切，切了以后再过柱子，流穿出来的就是我的样品，但凝血酶怎么除掉 3. 这样的话成本会不会很高 另外，有没有虫友有说明书，可不可以分享一下 不胜感激 |
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 小Poo |
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2楼2013-10-16 15:40:21
感谢参与，应助指数 +1
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3楼2013-10-16 22:42:31
fuyuandj86
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4楼2013-10-17 01:08:12
bullfrog325
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0624410024
金虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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475502411: 金币+5 2013-10-17 13:32:29
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-20 18:22:12
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你现在也只是怀疑是因为你的标签影响你的实验结果，你可以做对照看下，你可以用其他的带GST的融合蛋白做为阴性对照看看，如果为阳性那就说明是你的标签影响，如果阴性对照成立就说明不是标签的影响撒，不要动不动就切标签。 |
9楼2013-10-17 12:49:06
10楼2013-10-17 13:32:21
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