24小时热门版块排行榜    

查看: 3576  |  回复: 9

feiye2214

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】pGEX-4T-1质粒的抗性是什么?已有1人参与

小弟搞到这个pGEX-4T-1质粒,对它还不是很了解,它有什么抗性?还是转化后用的蓝白筛选?
在BamH I/Not I酶切后,插入目的基因片段,是不是这个位置?

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adou2008

银虫 (初入文坛)

feiye2214(金币+1): 2010-08-22 09:10:33
我以前用的是氨苄抗生素,
学习,学习,再学习
2楼2010-08-20 12:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一夜不留痕

银虫 (初入文坛)

feiye2214(金币+1): 2010-08-22 09:10:38
在含氨苄青霉素培养的,貌似用的限制性内切酶是BamHI/SalI,是用蓝白斑筛选的!
最好不相见,如此便可不相恋
3楼2010-08-20 12:53:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhandeguo1

银虫 (小有名气)

抗性

百度一下弄到质粒图谱就知道了。在多克隆位点选择酶切位点就对了。
4楼2010-08-20 13:46:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 一夜不留痕 at 2010-08-20 12:53:57:
在含氨苄青霉素培养的,貌似用的限制性内切酶是BamHI/SalI,是用蓝白斑筛选的!

这是图片,怎么插入片段,可以蓝白筛选?
有人说MCS不在lac Z段,就不能用蓝白筛选?
到底什么情况?
5楼2010-08-20 13:53:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

feiye2214(金币+1): 2010-08-22 09:10:54
是氨苄抗性,只要你选用的酶切位点在载体中有就可以把片段和载体酶切后进行连接,从你的图谱中没看到lacz的基因,所以应该没有蓝白斑的筛选功能
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
6楼2010-08-20 15:18:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

feiye2214(金币+1): 2010-08-22 09:11:00
氨苄青霉素抗性
7楼2010-08-20 16:34:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guangming111

银虫 (小有名气)

双抗的吧,好像是
8楼2010-08-21 23:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上


feiye2214(金币+1): 2010-08-22 09:10:11
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~ 2010-08-22 09:21:57
GST标签后的多克隆位点可以用来插入片段,注意检查插入片段不要发生移码
这个质粒上有lacZ,在4540bp-4695bp处。但MCS位点不在lacZ处,所以不能用蓝白斑筛选,用氨苄抗性筛选也很好筛的
就是转化后不要培养过久免得长卫星菌落就好
终于熬成木虫了……
9楼2010-08-22 06:41:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hesu1105

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
怎么没有人回复解答啊?
相信我最后一定能成功
10楼2020-06-21 10:04:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 feiye2214 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今年什么时候会评啊 +8 lancet0903 2024-06-24 8/400 2024-06-26 19:11 by binfriedman
[考博] 对象没有,还非常想读博,难以抉择 +28 pvrw0224 2024-06-23 51/2550 2024-06-26 18:18 by zht950104
[有机交流] 有机物的酸酐如何准确表征 10+3 方酱 2024-06-24 7/350 2024-06-26 17:53 by 宁静远行
[论文投稿] 我在写关于多维空间的论文,希望能与大家交流,准备在science上发表 +8 lgf519 2024-06-24 10/500 2024-06-26 16:25 by 梦渺岚烟
[论文投稿] 第一篇论文投稿进程记录 +5 慎独的小花卷 2024-06-20 10/500 2024-06-26 15:24 by weichuny
[基金申请] 青年基金E02口青基去年几个函评专家? +6 他山攻玉之石 2024-06-25 9/450 2024-06-26 15:09 by 他山攻玉之石
[硕博家园] 【45岁以上博士】柔性人才引进项目,有补贴 +9 Dreamsummit 2024-06-24 18/900 2024-06-26 12:28 by hujm159
[教师之家] 神奇的中医 +8 水冰月月野兔 2024-06-24 10/500 2024-06-26 12:10 by lyfbangong
[基金申请] 评审专家会不会很在意申请人的单位啊 +11 lancet0903 2024-06-24 13/650 2024-06-26 11:42 by 漠上藜梭
[硕博家园] 申博雅思求助 +6 刘嘉研究究 2024-06-24 7/350 2024-06-26 07:08 by 小李醒yy
[有机交流] 对苯乙烯磺酰氯的合成机理 25+3 该死的科研 2024-06-24 5/250 2024-06-25 17:30 by 王学士
[教师之家] 复旦夏同学提出高校成年人学生退学不应该让家长审核,大家认同吗? +10 苏东坡二世 2024-06-22 17/850 2024-06-24 16:52 by wanghuawei
[基金申请] 国自然资助比率是不是要下降了?? +8 今晚推荐22 2024-06-21 12/600 2024-06-24 11:15 by Pickfoot
[基金申请] 青年和面上,哪个上会难度更大 +12 今晚推荐22 2024-06-21 18/900 2024-06-24 11:08 by 半简体
[公派出国] 博士csc联培会看重第一学历学校层次吗 +4 也就这样 2024-06-23 4/200 2024-06-24 08:18 by 晓目崇
[论文投稿] OSA期刊审稿逾期 +3 Thomas_Squid 2024-06-22 3/150 2024-06-23 15:20 by wspglt
[基金申请] 工材口青年基金上会可能性 +10 今晚推荐22 2024-06-19 13/650 2024-06-23 15:11 by Pickfoot
[有机交流] 求助 45+7 脂质纳米粒 2024-06-20 9/450 2024-06-23 07:52 by buhui7829
[基金申请] 工材口青年基金大概什么样能上会? +15 今晚推荐22 2024-06-20 21/1050 2024-06-22 23:04 by qbn0326
[论文投稿] ACS 编辑的意见 10+3 哈哈妞1993 2024-06-20 3/150 2024-06-21 17:06 by 投个论文
信息提示
请填处理意见