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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 求助，纯化之后的蛋白
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] 求助，纯化之后的蛋白 已有4人参与

求助，纯化之后的蛋白是什么样子，我纯化之后放在-20,并不是清澈的，淡乳白色，刚才用PBS透析，产生沉淀了，怎么办？产生沉淀之后的蛋白能不能离心，要上清？
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踏实
1楼 2015-03-22 22:50:41
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
洗脱蛋白-20度冷冻保存复溶后也产生沉淀，怎么办？？？？？？？？？？？？？？？？？？？
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踏实
2楼2015-03-22 22:54:10
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yuyelin

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有些蛋白在低温容易发生凝聚的
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若嗔若痴，不见风云
3楼2015-03-23 15:21:25
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuyelin at 2015-03-23 15:21:25
有些蛋白在低温容易发生凝聚的

那样是变性吗？我四个基因都产生沉淀了
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踏实
4楼2015-03-23 17:03:31
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yuyelin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hajierlove at 2015-03-23 17:03:31
那样是变性吗？我四个基因都产生沉淀了...

一般都是物理性的变化，还有要看你溶液的ph是不是在你蛋白的pI点附近。
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若嗔若痴，不见风云
5楼2015-03-24 08:40:22
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pnkyh

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
温度和pH会有影响，pH达到等电点的话溶解度会小。我们也做出过淡乳白色的调了下pH就透明了
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6楼2015-03-24 10:34:07
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by pnkyh at 2015-03-24 10:34:07
温度和pH会有影响，pH达到等电点的话溶解度会小。我们也做出过淡乳白色的调了下pH就透明了

你好，你是直接调透析液的PH吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
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踏实
7楼2015-03-24 13:11:25
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bao可雅

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

沉淀的蛋白质是没有用的，并且量很少，最好不要复溶，可以离心，取上清
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8楼2015-04-01 15:28:15
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lha123

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主保存蛋白时可以加入10%左右的甘油试试，不知楼主是如何冻存蛋白的，我们一般先用液氮速冻，然后再低温保存。
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加油！2015
9楼2015-06-03 16:45:40
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