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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] 求助,纯化之后的蛋白 已有4人参与

求助,纯化之后的蛋白是什么样子,我纯化之后放在-20,并不是清澈的,淡乳白色,刚才用PBS透析,产生沉淀了,怎么办?产生沉淀之后的蛋白能不能离心,要上清?
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踏实
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

洗脱蛋白-20度冷冻保存复溶后也产生沉淀,怎么办???????????????????
踏实
2楼2015-03-22 22:54:10
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yuyelin

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有些蛋白在低温容易发生凝聚的
若嗔若痴,不见风云
3楼2015-03-23 15:21:25
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yuyelin at 2015-03-23 15:21:25
有些蛋白在低温容易发生凝聚的

那样是变性吗?我四个基因都产生沉淀了
踏实
4楼2015-03-23 17:03:31
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yuyelin

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hajierlove at 2015-03-23 17:03:31
那样是变性吗?我四个基因都产生沉淀了...

一般都是物理性的变化,还有要看你溶液的ph是不是在你蛋白的pI点附近。
若嗔若痴,不见风云
5楼2015-03-24 08:40:22
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pnkyh

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
温度和pH会有影响,pH达到等电点的话溶解度会小。我们也做出过淡乳白色的调了下pH就透明了
6楼2015-03-24 10:34:07
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by pnkyh at 2015-03-24 10:34:07
温度和pH会有影响,pH达到等电点的话溶解度会小。我们也做出过淡乳白色的调了下pH就透明了

你好,你是直接调透析液的PH吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
踏实
7楼2015-03-24 13:11:25
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bao可雅

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

沉淀的蛋白质是没有用的,并且量很少,最好不要复溶,可以离心,取上清
8楼2015-04-01 15:28:15
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lha123

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主保存蛋白时可以加入10%左右的甘油试试,不知楼主是如何冻存蛋白的,我们一般先用液氮速冻,然后再低温保存。
加油!2015
9楼2015-06-03 16:45:40
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